發(fā)酵工程總結(jié)()
發(fā)酵工程總結(jié)(供參考)
1.自然選菌(從自然界篩選菌種的步驟主要有哪些?)(12)
采樣,增殖培養(yǎng),純種分離,性能測(cè)定。生產(chǎn)中選種,抗噬菌體菌種選育,菌落形態(tài)變異菌種選育。利用環(huán)境選擇作用選菌。2.溶氧控制
加強(qiáng)攪拌,增大空氣流量,減小培養(yǎng)基粘度,提高氧分壓,適當(dāng)?shù)南輨?.影響因素(PH,溶氧)
PH:攪拌,空氣流量,培養(yǎng)液性質(zhì),消泡劑,微生物生長(zhǎng),離子強(qiáng)度,溫度,氧分壓溶氧:菌種,培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)條件4.發(fā)酵罐基本條件
適宜高徑比,承受一定壓力,氣液充分混合,足夠冷卻面積,減少死角,滅菌徹底,密封嚴(yán)密,減少泄漏。
5.化學(xué)修飾調(diào)節(jié)理論,變構(gòu)調(diào)節(jié)
指通過酶分子本身化學(xué)組成上的改變引起酶活性的變化,修飾等,導(dǎo)致酶的化學(xué)組成發(fā)生變化從而提高或降低酶的活性。
指特殊效應(yīng)物(變結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì))與酶結(jié)合后,使酶分子的空間構(gòu)型發(fā)生變化,導(dǎo)致酶活性的改變。稱調(diào)節(jié)酶(變構(gòu)酶)6.微生物酶制劑的優(yōu)點(diǎn)
酶品種多,新酶種易得。/菌種易誘變,代謝易調(diào)控。/易培養(yǎng)和規(guī);,周期短,產(chǎn)量大;蛞撞僮,優(yōu)質(zhì)種易得。/不受季節(jié),氣候和地域限制。7.空氣過濾除菌機(jī)理
布朗擴(kuò)散運(yùn)動(dòng),攔截滯留作用,慣性沖擊作用,重力沉降作用,靜電吸附作用。8.機(jī)械攪拌發(fā)酵罐特點(diǎn)
優(yōu)點(diǎn):PH和溫度易控,使用和適應(yīng)性好,放大容易,應(yīng)用廣缺點(diǎn):動(dòng)力消耗大,易損傷細(xì)胞,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,不易清洗,易污染9.雜交育種的類型(p28)
細(xì)菌`:接合,轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)導(dǎo)。霉菌:有性生殖和準(zhǔn)性生殖10.雜菌檢測(cè)的方法(P98)
平板劃線、液體培養(yǎng)基、顯微鏡檢查
11.酶合成和酶活性的調(diào)節(jié)(誘導(dǎo)酶,組成酶)
酶活性:酶活性的調(diào)節(jié)是指微生物通過改變已有酶的催化活性來調(diào)節(jié)代謝的進(jìn)行酶合成:酶的合成調(diào)節(jié)是說微生物通過調(diào)節(jié)酶的種類和數(shù)量來調(diào)節(jié)代謝的進(jìn)行.誘導(dǎo)酶:又稱適應(yīng)性酶,指依賴于酶底物或底物的結(jié)構(gòu)類似物(誘導(dǎo)劑)的存在而合成的酶。組成酶:指不依賴與酶底物或底物的結(jié)構(gòu)類似物的存在而合成的酶12.培養(yǎng)基配置的原則針對(duì)培養(yǎng)的目的和需要控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比調(diào)節(jié)PH及氧化還原電勢(shì)價(jià)廉易得原料及注意事項(xiàng)13.影響滅菌因素
培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)基物理狀態(tài),培養(yǎng)基PH,培養(yǎng)基微生物數(shù)量,微生物細(xì)胞含水量,微生物細(xì)胞菌齡,微生物耐熱性。14.分支生物合成的調(diào)節(jié)方式
同工酶調(diào)節(jié)順序反饋調(diào)節(jié)累加反饋調(diào)節(jié)增效反饋調(diào)節(jié)激活和抑制聯(lián)合調(diào)節(jié)酶的共作修飾
15.抗生素,產(chǎn)生菌的選育抗生素產(chǎn)生菌的分離
抗性菌的實(shí)驗(yàn)(交叉畫線法)16.基因工程育種的基本過程目的基因的獲取載體的選擇和制備目的基因與載體融合重組基因?qū)胨拗骷?xì)胞目的基因的篩選與鑒定17.雜菌污染的途徑
設(shè)備機(jī)構(gòu)不嚴(yán)密,閥門不多,設(shè)備有死角
空氣過濾不徹底種子不純?cè)蠝缇粡氐篆h(huán)境衛(wèi)生不合格18.原生質(zhì)體融合,篩選,制備(P32~34)見書上的圖
指通過人為的方法,使遺傳性狀不同的兩個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合,借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。19.變異菌的篩選方案(P24)
搖瓶篩選、從菌落和個(gè)體形態(tài)上的變化進(jìn)行分析,平皿快速檢測(cè),營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選(梯度篩選),抗性突變株篩選,高分子廢棄物分解菌篩選20.微生物代謝調(diào)控的途徑①發(fā)酵條件的控制②改變細(xì)胞透性
③菌種遺傳特性的改變
21.次級(jí)代謝和初級(jí)代謝的比較1概念不同
在微生物的新陳代謝中,一般將微生物從外界吸收各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過分解代謝和合成代謝,生成維持生命活動(dòng)的物質(zhì)和能量的過程,稱為初級(jí)代謝
而次級(jí)代謝是相對(duì)于初級(jí)代謝而提出的一個(gè)概念。一般認(rèn)為,次級(jí)代謝是指微生物在一定的生長(zhǎng)時(shí)期,以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體,合成一些對(duì)微生物的生命活動(dòng)無明確功能的物質(zhì)的過程2產(chǎn)物不同
初級(jí)代謝的產(chǎn)物,即為初級(jí)代謝產(chǎn)物。如單糖或單糖衍生物、核苷酸、維生素、氨基酸、脂肪酸等單體以及由它們組成的各種大分子聚合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖、脂質(zhì)等生命必需物質(zhì)。
通過次級(jí)代謝合成的產(chǎn)物稱為次級(jí)代謝產(chǎn)物,大多是分子結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物。根據(jù)其作用,可將其分為抗生素、激素、生物堿、毒素等類型
次級(jí)代謝產(chǎn)物可積累在細(xì)胞內(nèi),但通常都分泌到細(xì)胞外,有些與機(jī)體的分化有一定的關(guān)系,并在同其它生物的生存競(jìng)爭(zhēng)中起著重要的作用。<3存在范圍不同
初級(jí)代謝的代謝系統(tǒng)、代謝途徑和代謝產(chǎn)物在各類生物中都基本相同,它是一類普遍存在于各類微生物中的一種基本代謝類型。<
次級(jí)代謝只存在于某些微生物中,并且代謝途徑和代謝產(chǎn)物因生物不同而不同,就是同種生物也會(huì)由于培養(yǎng)條件不同而產(chǎn)生不同的次級(jí)代謝產(chǎn)物。<4對(duì)微生物的作用不同
通過初級(jí)代謝,能使?fàn)I養(yǎng)物轉(zhuǎn)化為結(jié)構(gòu)物質(zhì)、具生理活性物質(zhì)或?yàn)樯L(zhǎng)提供能量,因此初級(jí)代謝產(chǎn)物,通常都是機(jī)體生存必不可少的物質(zhì),只要在這些物質(zhì)的合成過程的某個(gè)環(huán)節(jié)上發(fā)生障礙,輕則引起生長(zhǎng)停止,重則導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生突變或死亡,是一種基本代謝類型。
次級(jí)代謝產(chǎn)物一般對(duì)菌體自身的生命活動(dòng)無明確功能,不參與細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成,也不是酶活性必需的,不是機(jī)體生長(zhǎng)與繁殖所必需的物質(zhì),即使在次級(jí)代謝的某個(gè)環(huán)節(jié)上發(fā)生障礙,也不會(huì)導(dǎo)致機(jī)體生長(zhǎng)的停止或死亡,至多只是影響機(jī)體合成某種次級(jí)代謝產(chǎn)物的能力。但許多次級(jí)代謝產(chǎn)物通常對(duì)人類和國民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展有重大影響5同微生物生長(zhǎng)過程的關(guān)系
初級(jí)代謝自始至終存在于生活的菌體中,同菌體的生長(zhǎng)過程呈平行關(guān)系,只有微生物大量生長(zhǎng),才能積累大量初級(jí)代謝產(chǎn)物
次級(jí)代謝則是在菌體生長(zhǎng)到一定時(shí)期內(nèi)(通常是微生物的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期或穩(wěn)定期)產(chǎn)生的,它與機(jī)體的生長(zhǎng)不呈平行關(guān)系,一般可明顯地表現(xiàn)為菌體的生長(zhǎng)期和次級(jí)代謝產(chǎn)物形成期二個(gè)不同的時(shí)期。
6對(duì)環(huán)境條件的敏感性或遺傳穩(wěn)定性上明顯不同
初級(jí)代謝產(chǎn)物對(duì)環(huán)境條件的變化敏感性小(即遺傳穩(wěn)定性大),而次級(jí)代謝產(chǎn)物對(duì)環(huán)境條件變化很敏感,其產(chǎn)物的合成往往因環(huán)境條件變化而停止。7相關(guān)酶的專一性不同
相對(duì)來說催化初級(jí)代謝產(chǎn)物合成的酶專一性強(qiáng),催化次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的某些酶專一性不強(qiáng),因此在某種次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的培養(yǎng)基中加入不同的前體物時(shí),往往可以導(dǎo)致機(jī)體合成不同類型的次級(jí)代謝產(chǎn)物
另外,催化次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的酶往往是一些誘導(dǎo)酶,它們是在菌體對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期或穩(wěn)定生長(zhǎng)期里,由于某種中間代謝產(chǎn)物積累而誘導(dǎo)機(jī)體合成的一種能催化次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的酶,這些酶通常因環(huán)境條件變化而不能合成。8兩者既有區(qū)別性又有連續(xù)性
在微生物的新陳代謝中,先產(chǎn)生初級(jí)代謝產(chǎn)物,后產(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物。初級(jí)代謝是次級(jí)代謝的基礎(chǔ),它可以為次級(jí)代謝產(chǎn)物合成提供前體物和所需要的能量;初級(jí)代謝產(chǎn)物合成中的關(guān)鍵性中間體也是次級(jí)代謝產(chǎn)物合成中的重要中間體物質(zhì),
而次級(jí)代謝則是初級(jí)代謝在特定條件下的繼續(xù)與發(fā)展,可避免初級(jí)代謝過程中某種(或某些)中間體或產(chǎn)物過量積累對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的毒害作用22.自吸式發(fā)酵罐和氣升式發(fā)酵罐的特點(diǎn)~自吸:優(yōu)點(diǎn),節(jié)約投資,減少廠房面積溶氧速率高,效率高,能耗低
設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便,便于自動(dòng)化,連續(xù)化生產(chǎn)效率高,經(jīng)濟(jì)效益好缺點(diǎn):罐壓效低,易染菌
氣升:優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)單易行,維修清洗方便
能耗低,操作無噪音,無需消泡,裝填系數(shù)較高,不宜染菌,溶氧效率高缺點(diǎn):不能代替好氣量較小的發(fā)酵罐
對(duì)于粘度大的發(fā)酵液溶氧系數(shù)較低。
23.雜菌和噬菌體污染后如何挽救雜菌:種子罐,放棄發(fā)酵罐挽救前期:大量接種或滅菌再接種
后期:正常發(fā)酵至終了,加入抑制雜菌的物質(zhì),提早放罐。
噬菌體:接入對(duì)數(shù)期后的生產(chǎn)菌株培養(yǎng)抗型菌株或更換生產(chǎn)菌株殺死噬菌體(70~80度)后在接種
24.試述發(fā)酵條件對(duì)發(fā)酵的影響、影響因素及其控制。
營(yíng)養(yǎng)條件的控制:碳氮、無機(jī)鹽、維生素、和金屬離子濃度的控制。
溫度的影響與控制:酶的最適溫度,菌體本身特性。各階段需要進(jìn)行溫度控制,最適溫度。
溶氧的影響與控制:大多數(shù)微生物需氧。因素:攪拌,空氣流量,培養(yǎng)液性質(zhì),消泡劑,微生物生長(zhǎng),離子強(qiáng)度,溫度,氧分壓。
控制:加強(qiáng)攪拌,增大空氣流量,減小培養(yǎng)基粘度,提高氧分壓,適當(dāng)?shù)南輨?/p>
PH的影響與控制:最適PH范圍和耐受PH范圍,過高和過低會(huì)影響繁殖和產(chǎn)物的產(chǎn)出。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的積累,生物合成途徑,菌體形態(tài),產(chǎn)物穩(wěn)定性。因素:菌種,培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)條件
控制:過酸加NaOH,蛋白質(zhì),提高通風(fēng)量過堿:H2SO4,糖類,乳酸,降低通風(fēng)量
補(bǔ)料,攪拌速度和通風(fēng)量,溫度,罐壓及通風(fēng)量,消泡劑和糖用量。
泡沫的影響和控制:
浪費(fèi)和污染,增加染菌機(jī)會(huì),降低設(shè)備利用率,干擾空氣,妨礙微生物生長(zhǎng)代謝,影響CO2排出,消泡劑對(duì)發(fā)酵后期分離帶來不便,滅菌不徹底,酶失活。因素:外界引入,內(nèi)部產(chǎn)生
控制:物理法:通過機(jī)械強(qiáng)烈運(yùn)動(dòng)或壓力和溫度等的變化促使泡沫破裂,化學(xué):消泡劑
25.請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)從土壤中篩選含淀粉酶的微生物的試驗(yàn)方案
1、取樣
選擇含淀粉豐富的土壤為最佳,在不同的地方取樣.2、純凈水溶解3、高溫處理
60度的高溫處理樣品1小時(shí),目的是殺死微生物營(yíng)養(yǎng)體,殘留芽胞4、配培養(yǎng)基
培養(yǎng)基用含淀粉的培養(yǎng)基配制,配好在滅菌。(放碘)
5、稀釋T渡
將溶解的樣品按T渡稀釋。6、接種
涂布法,澆注法,劃線法將樣品接種到培養(yǎng)基上。7、培養(yǎng)2~3天
8、初篩與純化
挑取有降解圈的細(xì)菌單菌落,并在平板上純化3次,然后4攝氏度斜面保存。再培養(yǎng)7、復(fù)篩
測(cè)定其淀粉酶活,最后確定誘變出發(fā)菌株9、誘變
選擇合適誘變?cè),可采用物理誘變和化學(xué)誘變相結(jié)合的復(fù)合誘變方式。10、篩選
采用初篩和復(fù)篩方案進(jìn)行誘變鑒定11、遺傳穩(wěn)定性鑒定篩選出的菌株,要經(jīng)過多次傳代之后,再進(jìn)一步鑒定其產(chǎn)生淀粉酶的能力是否發(fā)生了變化。如果產(chǎn)生了回復(fù)突變,則需要重復(fù)誘變篩選過程,直至到篩選出遺傳穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株為止。
名詞解釋:
分批發(fā)酵:具有初始限制量基質(zhì)的一種發(fā)酵方式
補(bǔ)料分批發(fā)酵:分批發(fā)酵為基礎(chǔ),間歇或連續(xù)的補(bǔ)上新鮮培養(yǎng)基的一種發(fā)酵方式混菌發(fā)酵:多種微生物混合在一起共同用一種培養(yǎng)基進(jìn)行的發(fā)酵。
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1.發(fā)酵工程的定義
發(fā)酵工程是利用微生物的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)來生產(chǎn)人們所需產(chǎn)品的工程技術(shù),它將微生物學(xué)、生物化學(xué)和化學(xué)工程學(xué)的基本原理有機(jī)地結(jié)合起來,是生物技術(shù)的重要組成部分,是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。2.發(fā)酵工程的應(yīng)用
醫(yī)藥工業(yè)食品工業(yè)能源工業(yè)化學(xué)工業(yè)冶金工業(yè)農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)3。發(fā)酵的一般工藝過程
(1)培養(yǎng)基的選擇,制備(2)培養(yǎng)基,發(fā)酵罐以及附屬設(shè)備滅菌(3)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)(4)控制最適發(fā)酵的條件,使微生物生長(zhǎng)并產(chǎn)生大量的代謝產(chǎn)物(5)產(chǎn)品提取和精制4.培養(yǎng)基配制要求
A.培養(yǎng)基應(yīng)滿足微生物的需要;B.適宜的濃度、配比、pH值;
C.培養(yǎng)基原料發(fā)酵率高,發(fā)酵后所形成的副產(chǎn)物盡可能的少;D.培養(yǎng)基原料質(zhì)量高,價(jià)格低廉;且性能穩(wěn)定,資源豐富,便于采購運(yùn)輸,適合大規(guī)模儲(chǔ)藏,能保證生產(chǎn)上的供應(yīng);
E.所選用的培養(yǎng)基應(yīng)能滿足總體工藝的要求,如不應(yīng)該影響通氣、提取、純化及廢物處理等。5.培養(yǎng)基的成分
碳源、氮源、無機(jī)鹽、微量元素、水、前體6。種子的擴(kuò)大培養(yǎng)
種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后,再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。7.發(fā)酵動(dòng)力學(xué):
它以化學(xué)熱力學(xué)(研究反應(yīng)的方向)和化學(xué)動(dòng)力學(xué)(研究反應(yīng)的速度)為基礎(chǔ),研究發(fā)酵過程中變量在活細(xì)胞作用下變化的規(guī)律,以及各種發(fā)酵條件對(duì)這些變量變化速度的影響。8.發(fā)酵動(dòng)力學(xué)研究目的:
有助于我們更加深入地認(rèn)識(shí)和掌握發(fā)酵過程,為工業(yè)發(fā)酵的模擬、優(yōu)化和控制訂下良好的理論基礎(chǔ)。
9.發(fā)酵動(dòng)力學(xué)研究?jī)?nèi)容
細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡動(dòng)力學(xué)基質(zhì)消耗動(dòng)力學(xué)氧消耗動(dòng)力學(xué)
二氧化碳生成動(dòng)力學(xué)產(chǎn)物合成和降解動(dòng)力學(xué)代謝熱生成動(dòng)力學(xué)10.分批發(fā)酵動(dòng)力學(xué)生物反應(yīng)模式1).停滯期
停滯期是微生物細(xì)胞適應(yīng)新環(huán)境的過程。2).對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期
處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的微生物細(xì)胞的生長(zhǎng)速率大大加快單位時(shí)間內(nèi)細(xì)胞的數(shù)目或質(zhì)量的增加維持穩(wěn)定,并達(dá)到最大值。3).穩(wěn)定期
在細(xì)胞生長(zhǎng)代謝過程中,培養(yǎng)基中的底物不斷被消耗,一些對(duì)微生物生長(zhǎng)代謝有害的物質(zhì)在不斷積累。受此影響,微生物的生長(zhǎng)速率和比生長(zhǎng)速率就會(huì)逐漸下降,直至完全停止,這時(shí)就進(jìn)入穩(wěn)定期。4).死亡期
在死亡期,細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能源儲(chǔ)備已消耗殆盡,不能再維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝,因而細(xì)胞開始死亡。
11.連續(xù)發(fā)酵動(dòng)力學(xué)
所謂連續(xù)培養(yǎng),就是在發(fā)酵過程中一邊補(bǔ)入新鮮料液,一邊以相近的流速放料,維持發(fā)酵液原來的體積。
分批補(bǔ)料發(fā)酵動(dòng)力學(xué)
所謂分批補(bǔ)料培養(yǎng)技術(shù),是指在分批培養(yǎng)過程中,間歇或連續(xù)的添加新鮮培養(yǎng)基的方法。
補(bǔ)料分批培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用
12.發(fā)酵控制
收集能反映發(fā)酵過程變化的各種理化參數(shù)
將各種參數(shù)變化和發(fā)酵代謝規(guī)律聯(lián)系起來各種參數(shù)生物學(xué)意義建立各種數(shù)學(xué)模型以描述各參數(shù)之間隨時(shí)間變化的關(guān)系發(fā)酵控制
13.種齡:是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。
接種量:是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。接種量的確定
移入種子的體積接種量=接種后培養(yǎng)液的體積
在抗生素工業(yè)生產(chǎn)中,大多數(shù)抗生素發(fā)酵的最適接種量為7%一15%,有時(shí)可增加到20%一28%。接種量的大小決定于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵罐中生長(zhǎng)繁殖的速度。采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖到達(dá)高峰的時(shí)間,使產(chǎn)物的形成提前到來。14.在線檢測(cè)參數(shù)和離線檢測(cè)參數(shù)
在線檢測(cè)參數(shù)指不經(jīng)取樣直接從發(fā)酵罐上安裝的儀表上得到的參數(shù),如溫度、pH、攪拌轉(zhuǎn)速;
離線檢測(cè)參數(shù)指取出樣后測(cè)定得到的參數(shù),如殘?zhí)、NH2-N、菌體濃度。
15.重要參數(shù)
溫度溶解氧濃度pHCO2碳源氮源前體濃度補(bǔ)料控制泡沫16.種子質(zhì)量的判斷
由于菌種在種子罐中的培養(yǎng)時(shí)間較短,可供分析的參數(shù)較少,使種子的內(nèi)在質(zhì)量難以控制,為了保證各級(jí)種子移種前的質(zhì)量,除了保證規(guī)定的培養(yǎng)條件外,在過程中還要定期取樣測(cè)定一些參數(shù)以觀察基質(zhì)的代謝變化及菌絲形態(tài)是否正常。在生產(chǎn)中通常測(cè)定的參數(shù)為1)pH;
2)培養(yǎng)基滅菌后磷、糖、氨基氮的含量;
3)菌絲形態(tài)、菌絲濃度和培養(yǎng)液外觀(色素、顆粒等);4)其他參數(shù),如接前抗生素含量、某種酶活力等17。菌種改良目的
提高產(chǎn)量、提高產(chǎn)物的純度,減少副產(chǎn)物;提高有效組分,減少色素等雜質(zhì)、改變菌種性狀,改善發(fā)酵過程、菌種的遺傳性狀,特別是生產(chǎn)性狀穩(wěn)定、開發(fā)新品種18.發(fā)酵工業(yè)菌種的要求
培養(yǎng)基原料廉價(jià),生成的目的產(chǎn)物產(chǎn)量高、易于回收、生長(zhǎng)較快,發(fā)酵周期短、培養(yǎng)條件易于控制、抗噬菌體及雜菌污染能力強(qiáng)、菌種不易變異退化、對(duì)放大設(shè)備的適應(yīng)性強(qiáng)、菌種不是病原菌。
19.菌種保藏方法
斜面低溫保藏法砂土管保藏法冰凍真空干燥法液氮超低溫保藏20.發(fā)酵熱
所謂發(fā)酵熱就是發(fā)酵過程中釋放出來的凈熱量。Q發(fā)酵=Q生物+Q攪拌+Q通氣-Q蒸發(fā)-Q顯-Q輻射21.參數(shù)分類
代謝參數(shù)按性質(zhì)分可分三類:
物理參數(shù):溫度、攪拌轉(zhuǎn)速、空氣壓力、空氣流量、溶解氧、表觀粘度、排氣氧(二氧化碳)濃度等
化學(xué)參數(shù):基質(zhì)濃度(包括糖、氮、磷)、pH、產(chǎn)物濃度、、核酸量等
生物參數(shù):菌絲形態(tài)、菌濃度、菌體比生長(zhǎng)速率、呼吸強(qiáng)度、基質(zhì)消耗速率、關(guān)鍵酶活力等從檢測(cè)手段分可分為:直接參數(shù)、間接參數(shù)
直接參數(shù):通過儀器或其它分析手段可以測(cè)得的參數(shù),如溫度、pH、殘?zhí)堑乳g接參數(shù):將直接參數(shù)經(jīng)過計(jì)算得到的參數(shù),如攝氧率等22,生物熱:
在發(fā)酵過程中,菌體不斷利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),將其分解氧化而產(chǎn)生的能量,其中一部分用于合成高能化合物(如ATP)提供細(xì)胞合成和代謝產(chǎn)物合成需要的能量,其余一部分以熱的形式散發(fā)出來,這散發(fā)出來的熱就叫生物熱。23溫度對(duì)發(fā)酵的影響:
(1)酶學(xué)方面:在一定溫度范圍內(nèi),溫度升高,反應(yīng)速率加大,有利于菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物
積累,但菌體的衰退也加快,菌體對(duì)氧的消耗相應(yīng)加快,而溫度升高時(shí),氧的溶解度下降,所以應(yīng)綜合考慮
(2)產(chǎn)物方面:溫度能影響菌體分泌的產(chǎn)物種類及酶系
(3)菌體特性方面:同種菌體在生長(zhǎng)和產(chǎn)物積累階段所要求的溫度往往有差別,多數(shù)情況下是最適生長(zhǎng)溫度比產(chǎn)物積累的最適溫度要略高些。
24溶解氧的控制方法:氣體的成分、攪拌的速度、擋板、通氣速率、罐壓、基質(zhì)濃度、表面活性劑、溫度
25.發(fā)酵過程pH變化的原因:
1、基質(zhì)代謝:(1)糖代謝(2)氮代謝(3)生理酸堿性物質(zhì)利用后pH會(huì)上升或下降2、產(chǎn)物形成
3、菌體自溶,pH上升,發(fā)酵后期,pH上升。26.pH對(duì)發(fā)酵的影響(1)pH影響酶的活性。
(2)pH值影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷的改變,從而改變細(xì)胞膜的透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)
物質(zhì)的吸收及代謝物的排泄,因此影響新陳代謝的進(jìn)行
(3)pH值影響培養(yǎng)基某些成分和中間代謝物的解離,從而影響微生物對(duì)這些物質(zhì)的利用(4)pH影響代謝方向27.pH的控制:1、調(diào)節(jié)好基礎(chǔ)料的pH
2、在基礎(chǔ)料中加入維持pH的物質(zhì)3、通過補(bǔ)料調(diào)節(jié)pH
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