實驗動物總結(jié)
非多選:
實驗動物:指經(jīng)人工飼養(yǎng)、繁育,對其攜帶的微生物及寄生蟲實行控制、遺傳背景明確或來源清楚,應(yīng)用于科
學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)和鑒定以及其它科學(xué)實驗的動物。亦稱狹義的實驗動物
實驗用動物:泛指所有應(yīng)用于科學(xué)實驗的動物,包括實驗動物、野生動物、經(jīng)濟動物和觀賞動物。也稱廣義的
實驗動物.實驗動物科學(xué)誕生于20世紀(jì)50年代。國際實驗動物科學(xué)協(xié)會的簡稱為ICLAS,其網(wǎng)址為中國實驗動物信息網(wǎng):
我國《實驗動物質(zhì)量管理法》頒布于1997年,由科技部聯(lián)合技術(shù)監(jiān)督局等單位共同頒布!秾嶒瀯游锕芾項l例》
是1988年經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn)頒布的。世界最大的實驗大、小鼠商品化生產(chǎn)、銷售公司:美國查士利華實驗室1961年,ICLA與WHO合作,于1979年改名為ICLAS
20世紀(jì)40年代,美、日、法等過相繼成立了實驗動物學(xué)會或類似組織我國已建立嚙齒類動物的種子中心(上海和北京)。國家實驗動物質(zhì)量檢測中心掛靠在中國醫(yī)科院實驗動物所GLP(良好實驗室操作規(guī)范)是用于新藥臨床前安全性評價的法規(guī)
《實驗動物管理條例》規(guī)定,實驗動物繁育和動物實驗不能在同一區(qū)域。
實驗動物許可證的有效期為5年,生產(chǎn)許可證的申請必須種子來源可靠,有健全的質(zhì)量管理制度,環(huán)境符合國
家標(biāo)準(zhǔn)。許可證的發(fā)放向科技部門申請,由科技部門組織專家評審,合格后發(fā)放許可證。包括生產(chǎn)和使用許可證兩種。國家種子中心、實驗動物質(zhì)量檢測機構(gòu)的主要任務(wù)(p82)
近交系:連續(xù)20代或20代以上近親交配所培育而成的品系。如BALB/C,C57BL/6J,DBA,C3H,A/He等(常以F
加數(shù)字表示近交代數(shù))。
封閉群:以非近親繁殖方式,不從外部引入新個體的前提下至少連續(xù)繁殖4代以上。引種數(shù)目不少于25對。
如KM,SD,Wistar等。雜交群:不同品系或種群間雜交產(chǎn)生的后代
近交系小鼠常選用10個染色體上的13個生化位點作為純度檢測的方法,而大鼠一般選用9個位點;皮膚移植
一般用同系異體移植。同源突變系:兩近交系除指明位點外其他基因完全相同重組近交系:兩近交系雜交后再連續(xù)20代近交而成(以Χ表示)
同源導(dǎo)入近交系:通過雜交-互交或回交等方式將一基因?qū)氲浇幌抵羞z傳污染:管理疏忽,本品系與其他品系動物交配
遺傳漂變:飼養(yǎng)過程中可能發(fā)生的隨機改變,多由于殘留雜合基因的分離
突變:基因組中某個核苷酸堿基的置換、缺失或插入引起等位基因的改變。近交系數(shù):表示近交程度普通動物:不攜帶規(guī)定的人畜共患病原和烈性傳染病病原
清潔動物:除普通動物應(yīng)排除的病原外,不攜帶對動物危害大和對科研干擾大的病原
無特定病原體動物:除清潔動物應(yīng)排除的病原外,不攜帶潛在感染和條件致病、對科學(xué)實驗干擾大的病原無菌動物:不可檢出一切生命體
普通級兔應(yīng)排除兔出血癥病毒、普通豚鼠應(yīng)排除淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、普通猴應(yīng)排除猴B病毒實驗動物按遺傳控制可分為:近交系、封閉群、雜交群和突變系
實驗動物按微生物控制可分為:普通動物、清潔動物、無特定病原體(SPF)和無菌動物3R指的是:減少(Reduction)、替代(Replacement)、優(yōu)化(Refinement).動物福利除了生理福利外,還包括心理福利、衛(wèi)生福利、行為福利、環(huán)境福利
普通級、清潔級和SPF級動物微生物和寄生蟲的檢測頻率均為每三個月檢測一次。無菌動物為每年至少檢測一
次.取樣數(shù)量:群體〈100,取樣〉5只;群體大小為100-500,取樣〉10;群體〉500,取樣〉20只;無菌動物每個隔離器取樣2只
201*年6月,人類基因組計劃完成。小鼠是繼人之后第二個完成基因測序的哺乳動物。小鼠與人類功能基因的
同源性高達90%以上,是最為理想的模式動物,并作為基因改造的材料
動物實驗可用R=(A+B+C)×D+E公式表示,其中R表示動物實驗中實驗動物的總反應(yīng);A表示動物種間的共同
反應(yīng);B表示動物的品種品系特有反應(yīng);C表示動物的個體反應(yīng);D表示環(huán)境因素;E表示實驗誤差。(1959年由Russell和Bruch提出動物的表現(xiàn)型受周圍環(huán)境的影響而出現(xiàn)不同的演出型)光照對動物的是個強烈的刺激因素,起定時器的作用
屏障設(shè)施內(nèi),粗效空氣過濾器設(shè)置在取風(fēng)口;中效過濾器設(shè)置在正壓處;高效過濾器設(shè)置在系統(tǒng)末端
生物安全柜為活病原微生物的動物實驗設(shè)施;動\\植物確實存在或潛在危害的,該實驗需在感染性動物實驗設(shè)施
內(nèi)進行
普通環(huán)境飼養(yǎng)普通級動物;屏障環(huán)境飼養(yǎng)清潔級或SPF級動物;隔離環(huán)境飼養(yǎng)無菌動物
實驗動物環(huán)境指標(biāo)中,只有氨氣濃度是動態(tài)檢測指標(biāo);屏障環(huán)境的空氣潔凈度指標(biāo)為10000級
國標(biāo)中,生產(chǎn)型和使用型屏障系統(tǒng)大小鼠溫度為20-26℃;相對濕度為40%-70%;換氣次數(shù)為10-20次/h;氣流速
度為0.1-0.2m/s;壓強梯度為20-50Pa
國標(biāo)中,使用型屏障系統(tǒng)工作照度為150-300lx;動物照度為15-20lx
實驗動物環(huán)境檢測標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,普通犬\\兔繁育生產(chǎn)設(shè)施內(nèi)(生產(chǎn)型)溫度為16-28℃;濕度為40-70%;換氣次數(shù)為
8-10次/h;氣流速度0.1-0.2m/s;工作照度為150-300lx;動物照度100-200lx;(使用型)溫度為16-26℃;濕度為40-70%;換氣次數(shù)為8-10次/h;氣流速度0.1-0.2m/s;工作照度為150-300lx;動物照度100-200lx籠器具產(chǎn)品抽檢數(shù)量,籠箱及引水瓶為10-15只/次/批;網(wǎng)蓋和籠架為3-5只/次/批動物適宜的溫度為21-27℃,(相對)濕度為40-70%
國標(biāo)中規(guī)定,實驗動物室氨濃度應(yīng)小于14mg/m3;噪音低于60db;實驗動物設(shè)施的空調(diào)系統(tǒng)按空氣處理設(shè)備的設(shè)置不同一般分為集中式、局部式和半集中式。集中式即集中冷源,
并將全部空氣處理設(shè)備集中在同一機房內(nèi),處理過空氣經(jīng)風(fēng)道、風(fēng)口送至屏障設(shè)施內(nèi)?諝鈦y流利用稀釋作用是室內(nèi)產(chǎn)生的灰塵均勻擴散而被“沖淡”,一般采用上送下回的形式,使氣流自上而下
與塵埃重力沉降方向一致?諝鈦y流是流向單一,并具有一定的、均勻的斷面速度的氣流組織形式。豚鼠和獼猴體內(nèi)不能合成維生素C,須從飼料中獲得
大小鼠、兔目前常用的是顆粒飼料;貯存的顆粒飼料的含水率應(yīng)低于11%。飼料滅菌的最佳方式是輻照必須氨基酸只能從飼料中提供,而非必須氨基酸體內(nèi)能合成,無須從飼料中供給。
碳水化合物是體內(nèi)能量的主要來源,其中粗纖維可促進胃腸蠕動;無氮浸出物可提供熱能并可轉(zhuǎn)化成脂肪飼料中脂肪有真脂肪(由脂肪酸和甘油組成)和類脂肪(由脂肪酸和甘油及其他含氮物質(zhì)組成)飼料抽樣數(shù)量為0.5Kg/次/批
維生素A維持上皮的形態(tài)與功能;維生素D參與鈣磷調(diào)節(jié);維生素E與生殖泌乳有關(guān)
大小鼠飼料水分≤10%;豚鼠維持料蛋白≥17%,繁殖料蛋白≥20%;兔維持飼料粗蛋白≥14%,繁殖料粗蛋白
≥17%;犬維持飼料粗蛋白≥20%,繁殖料粗蛋白≥24%
一.小鼠:屬于嚙齒目,初生為紅色,12-13天睜眼,妊娠期19-21天,哺乳期為20-22天,雌性有5對乳頭,成年體重為18-40克,一般生育期為1年,壽命為1-2年.體溫為36.5℃,KM鼠每胎產(chǎn)8-15只,維生素A過量可致繁殖紊亂
二.大鼠:嚙齒目,新生為紅色,約5-6克;8-10天長牙;14-17天睜眼;妊娠期哺乳期均為21天;為常年多發(fā)情動物;成年體重為250-450克;壽命為2-3年;封閉群平均產(chǎn)仔數(shù)為8只;尾是散熱器官;無膽囊;體溫37.5℃。近交系大鼠:ACI,F344,SHR,BN,AGUS;封閉群:Long-Evans,Brown-Norway(飼養(yǎng)類),SD,Wistar
三.豚鼠:嚙齒目,草食動物,妊娠期為68天,哺乳期21天,剛出生就有視力,初生體重75-100克,有1對乳頭,每胎產(chǎn)3-4只,一般壽命為6年;體內(nèi)缺少合成維生素C的酶(猴),免疫學(xué)研究首選動物,是最早獲得無菌動物的實驗動物。無尾巴四.地鼠:嚙齒目,有冬眠和假妊娠現(xiàn)象,妊娠期16天,是哺乳動物中妊娠期最短的動物;哺乳期21天;有頰囊,可貯存食物;為全年多發(fā)情動物;壽命2-2.5年。中國地鼠無膽囊,有5對乳腺;金黃地鼠有乳腺6-7對。
五.兔:兔形目;有圓小囊;是眼科研究首選動物;妊娠期32天,哺乳期42天;為刺激性排卵動物(貓);有季節(jié)性換毛現(xiàn)象;有乳腺4對;其胸腔構(gòu)造與其他動物不同;有食糞癖;也有假妊娠現(xiàn)象;對缺鈣耐受力強;壽命8年左右;體溫為39.2℃六.犬:食肉目,紅綠色盲,幾乎沒汗腺,春秋季單發(fā)情動物,妊娠期60天,哺乳期60天,性周期180天,對脂肪耐受強.對嘔吐敏感,成年正常體溫是38℃,易建立條件反射
七.貓:除夏季外均可發(fā)情,屬季節(jié)性多發(fā)情動物;善攀登和跳躍;妊娠期63天,哺乳期60天;有4對乳頭;可根據(jù)光線的強弱靈敏的調(diào)節(jié)瞳孔;喜孤獨自由的生活;飼料中重點補充維生素.
八.猴:有頰囊;有月經(jīng)周期,與人的生殖生理非常接近;妊娠期165天左右,哺乳期6個月以上;對嘔吐反應(yīng)靈敏;主要組織相容性抗原(RhLA)與人的HLA相似;能用手操縱工具;是脊髓灰質(zhì)炎疫苗研究鑒定的動物
九.小型豬:偶蹄目;常年多發(fā)情;妊娠期114,哺乳期1個月;是皮膚燒傷實驗研究的首選動物;平均體溫為38℃
十.沙鼠:嚙齒目,大小介于大、小鼠之間,成年重78克;常年多發(fā)情;性成熟10-12月;平均壽命2-4年;有自發(fā)性癲癇。豢山⒛X缺血模型;應(yīng)激時腎上腺釋放糖皮質(zhì)激素和黃體酮
十一.其它:牛羊?qū)儆谂继隳,草食性多胃動物。馬屬于奇蹄目.鼠兔與家兔體形相似,是草食動物;有換毛現(xiàn)象;
動物標(biāo)記中染色法最簡單、適用于小動物短期實驗;常用染色液:苦味酸、硝酸銀、品紅;染色編號方法:先
左后右,先上后下,單一顏色可標(biāo)記1-10號;烙印常用溶于酒精的黑墨染色;還有耳緣剪孔法局部麻醉常用浸潤麻醉。大小鼠豚鼠肌肉注射部位:大腿外側(cè)面。腹腔注射常選擇在腹白線兩側(cè)
大小鼠尿液采集適宜用代謝籠,采集未污染尿液則應(yīng)采用導(dǎo)尿法;大小鼠大量采血常采用股動脈采血犬、貓的皮下注射一般在大腿外側(cè),靜脈注射不超過10ml
小鼠(20g)一般灌胃不超過0.8ml、腹腔注射不超過1.0ml、靜脈注射不超過0.8ml大鼠一般灌胃不超過5ml、腹腔注射不超過4ml、靜脈注射不超過4ml
靜脈注射兔:耳緣靜脈,最大容量10ml;猴:皮下淺層靜脈(小隱、股、頭靜脈),最大容量20ml;犬最大容
量100ml。肌肉注射最大給藥量猴:3ml;犬:4ml。兔少量多次采血一般為耳緣靜脈采血
動物實驗中,去除被毛的方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脫毛法;小動物一般采用剪毛法、大動物采用剃毛
法吸入麻醉常用乙醚、氯仿;腹腔和靜脈麻醉一般持續(xù)時間長,過程平穩(wěn),常用巴比妥類、氯氨酮、水合氯醛、
氨基甲酸等;全身麻醉時一般禁食不少于8小時
化學(xué)藥物致死最好采用CO2、KCl;家兔處死常用空氣栓塞法動物模型按產(chǎn)生原因分為:
自發(fā)性模型:應(yīng)用價值高,與人類相應(yīng)疾病相似程度高,但來源困難,種類有限
誘發(fā)性模型:來源多,條件易控制、但相似程度稍差;誘發(fā)性腫瘤模型分為原位和異位誘發(fā)抗疾病模型:特定疾病不在某動物身上發(fā)生
生物醫(yī)學(xué)模型:某些動物特殊的生理結(jié)構(gòu)如兔的胸腔結(jié)構(gòu)按中醫(yī)分類:陰虛、陽虛、氣虛、血虛、腎虛、厥脫癥
裸鼠為先天性無胸腺,常用于人體腫瘤移植研究
CBA/CIH為先天性B淋巴細(xì)胞功能缺陷。Beige小鼠為先天性NK細(xì)胞功能缺陷SHR為自發(fā)性高血壓大鼠,適合篩選抗高血壓藥物
一般幼齡動物對實驗因素較為敏感,慢性實驗因周期長而通常選用幼齡動物。一般實驗都選用成年動物清潔動物是國內(nèi)科研標(biāo)準(zhǔn)動物,而SPF動物是國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)動物
一般來說,淡水中生活的動物尿液是低滲的,海水中生活的動物尿液是等滲的,陸地上生活的動物尿液是高滲的,特別是沙漠中生活的動物,這種傾向性更明顯
豬:皮膚結(jié)構(gòu)與人相似、適合做燒傷實驗、人燒傷后的敷蓋物以及皮膚病的研究;冠狀動脈循環(huán)與人類似,食用高膽固醇食物易出現(xiàn)動脈粥樣硬化典型病灶
貓:刺激性排卵;適合做神經(jīng)節(jié)傳導(dǎo)阻滯影響的藥物實驗及觀察藥物對循環(huán)系統(tǒng)的作用等實驗
犬:是紅綠色盲,不能以紅綠作為條件刺激物來進行條件反射實驗;有嘔吐反射;長期毒性實驗中大動物實驗常選;易于調(diào)教,短期訓(xùn)練即可較好配合實驗,適合慢性實驗;適宜實驗外科學(xué)研究;可用壓迫膀胱法集尿豚鼠:不能合成維生素C;對人型結(jié)核桿菌高度易感,是結(jié)核病研究首選動物;也是鎮(zhèn)咳藥篩選試驗的首選動物;氣管平滑肌對致痙劑和藥物最敏感,常作為支氣管擴張藥物研究選用動物;
家兔:減壓神經(jīng)獨立分支,適合觀察減壓神經(jīng)對心臟影響試驗;適宜做發(fā)熱和檢查致熱源研究;刺激性排卵;常用于制備抗血清;家兔的胸腔中央有一層很薄的縱膈膜將胸腔分為左右兩部,互不相通,兩肺被肋胸膜隔開,心臟又有心包胸膜隔開;也是心血管疾病研究的較好模型;不宜做利尿或抗利尿藥物研究;沒嘔吐反射;食用高膽固醇高脂肪飼料后易形成動脈粥樣硬化及高脂血癥模型
大鼠:無膽囊,適合做膽管插管收集膽汁,進行消化功能的研究;常選做長期毒性實驗
地鼠:中國地鼠易產(chǎn)生真性糖尿病;小鼠:適合于各類唇裂、腭裂研究。青蛙和蟾蜍:反射弧實驗
獲得遺傳工程的基本技術(shù)手段:顯微注射轉(zhuǎn)基因、基因定位突變技術(shù)、基因化學(xué)誘變技術(shù)。其中顯微注射法是將外源目的基因注射到受精卵雄原核內(nèi)
模式生物:果蠅、線蟲、小鼠、斑馬魚、酵母,其中小鼠是研究人類基因功能的理想動物
基因敲除動物中研究最多最深入的是基因敲除小鼠。小鼠是繼人之后第二個完成基因組測序的動物
病毒:自然界最小微生物;在PH為7時較穩(wěn)定;對干燥的抵抗力與病毒的種類及干燥的方法有關(guān);多數(shù)能保存于50%的甘油中,確診病毒可通過檢查包涵體等方法來確定。
細(xì)菌:有球狀、桿狀和螺旋狀;有細(xì)胞壁;水是主要成分,固形物主要由C、H、O、N組成,占總重量的75-80%;比重一般大于1;PH值可影響其代謝活動;高溫是有效的滅菌方法
實驗動物的傳染病發(fā)展過程分為:潛伏期、前驅(qū)期、明顯期(發(fā)病期)和轉(zhuǎn)歸期
傳染源、傳播途徑和易感動物,稱為傳染鎖鏈。各類動物應(yīng)分室飼養(yǎng),以防交叉感染飼養(yǎng)和獸醫(yī)人員應(yīng)每年進行健康檢查。實驗動物的隔離措施主要用于新引入的動物
隔離是為了控制傳染源,隔離場所應(yīng)離開動物繁殖區(qū)。檢疫的目的是檢查有無潛在性疾病的存在
新引進的動物應(yīng)有供應(yīng)商的的實驗動物質(zhì)量合格證書。新引進的靈長類動物要特別防止B型皰疹病毒新引進的犬必須有犬瘟熱、傳染性肝炎、犬細(xì)小病毒等免疫證明
滅菌方法有熱滅菌法、冷滅菌法和Co60輻照滅菌法,消毒不能殺死細(xì)菌的芽孢,比滅菌的范圍窄
濕熱高壓滅菌:121℃,15min,干熱高壓滅菌:160℃,45min,預(yù)真空高壓滅菌:121℃,3min,低壓蒸汽加甲醛滅菌法:70-80℃,2h熏蒸消毒法一般為:15ml/m3福爾馬林加7.5克高錳酸鉀,熏蒸時室溫應(yīng)保持25℃,熏蒸后須靜置24-48h,后在通風(fēng)2-3天。80℃熱消毒藥水清洗是良好的消毒方法
實驗動物飼養(yǎng)或?qū)嶒炇疫M行噴霧消毒后關(guān)閉門窗,保持2-3h;門窗、墻壁等用中性洗滌液洗刷,必要時可用2%的熱燒堿水洗滌,在高壓水沖洗
鼠痘:又稱脫腳病,可經(jīng)皮膚傷口浸入機體,小鼠感染后肝、脾明顯腫大,康復(fù)后也會通過糞便長期排毒,從而污染環(huán)境能夠使病毒廣泛傳播。
淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎:只有持續(xù)感染的小鼠和急性感染的金黃地鼠才會傳播病毒;感染該病毒的小鼠,大腦型最為表現(xiàn)為后肢強直性伸展;小鼠感染并康復(fù)后終生含高滴度的病毒,可經(jīng)唾液、鼻分泌物及尿液向外排毒,同時該小鼠可成為無癥狀的帶毒者,并通過子宮和乳汁傳給后代,其后代可成為終生帶毒者;人感染主要表現(xiàn)為流感癥狀和腦膜炎
仙臺病毒:動物感染后肺部病變明顯,鼠肺呈楊梅色,易與浸潤性肺癌相混淆;動物體液免疫和細(xì)胞免疫功能普遍下降,妊娠大鼠會出現(xiàn)胚胎死亡;診斷主要通過免疫學(xué)方法,可采用過濾帽籠盒及剖宮產(chǎn)方法使動物免受感染
流行性出血熱:自然宿主為小型嚙齒類動物,污染塵埃飛沫形成氣溶膠吸入感染是其最主要傳播途徑;兔病毒性出血熱在自然條件下空氣傳播是主要傳播方式,其主要預(yù)防方式為定期注射組織滅活疫苗
肝炎病毒:鼠肝炎多數(shù)呈亞臨床或隱形感染,可改變各種免疫參數(shù),ELISA及免疫熒光法可作為特異性診斷;癥狀可見尿色變深等;嗜神經(jīng)型常引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)壞死;犬病毒性肝炎傳染方式很多,但不能通過呼吸道傳播
犬瘟熱:可通過消化道、呼吸道傳播;主要表現(xiàn)雙相熱型,即先升高,持續(xù)兩天后降至正常維持2-3天后再升高;我國廣泛使用的疫苗是雞胚細(xì)胞培養(yǎng)弱毒疫苗犬細(xì)小病毒:表現(xiàn)為急性出血性腸炎和非化膿性心肌炎,3-4周齡仔犬多呈急性心肌炎癥狀,病死率高達
80-100%;主要通過直接接觸或污染飼料由消化道傳播;腸炎型感染后出現(xiàn)腹瀉,糞便呈灰黃色液體,最后因心衰和酸中毒而死
狂犬病:流行呈連鎖性特征,病犬終因局部或全身麻痹而死;犬一旦發(fā)病即撲殺,并對周圍環(huán)境徹底消毒B病毒:恒河猴是自然宿主,幼猴感染后可能由于母源抗體免疫而呈現(xiàn)亞臨床癥狀;可引起人致死性腦感染沙門氏菌:人畜共患病,實驗動物中常見感染為鼠傷寒和腸炎沙門氏菌病;患病動物和帶菌者是主要傳染源布氏桿菌:可致動物流產(chǎn)。多殺性巴氏桿菌:可使動物發(fā)生出血性敗血癥
支原體:幼齡動物易感,常定居于動物呼吸道和生殖道;環(huán)境中氨濃度過高可促進其生長,繼而促進肺炎和中
耳炎的發(fā)生。志賀氏菌:實驗動物中主要危害獼猴,對人可引起細(xì)菌性痢疾
真菌生長最適溫度為37℃,實驗動物皮膚真菌感染的傳播方式主要為接觸感染,一旦感染后,實驗動物須全群
淘汰,環(huán)境徹底消毒。寄生蟲成蟲寄生的宿主為終末宿主。實驗動物感染弓形蟲后常出現(xiàn)流產(chǎn)或死胎現(xiàn)象兔球蟲病主要以腸道傳播,3月齡的家兔最易感,可感染人的球蟲叫等孢子球蟲
血液寄生蟲主要通過節(jié)肢動物作為媒介傳播。寄生蟲感染動物后,常引起血液中嗜酸性粒細(xì)胞增多。
多選題
ICLAS的目標(biāo)、實驗動物科學(xué)及實驗動物醫(yī)學(xué)、比較醫(yī)學(xué)的研究內(nèi)容、實驗用動物范疇、實驗動物生產(chǎn)的趨勢、
功能基因組學(xué)的作用、動物福利的內(nèi)容與要素、從業(yè)人員的范疇與要求、比較醫(yī)學(xué)研究目的、種子中心的條件、主要任務(wù)、國內(nèi)實驗動物領(lǐng)域的網(wǎng)站、國家實驗動物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)、有關(guān)許可證說法不正確的全選保種在201*種以上的單位:Jackson實驗室、NIH。21世紀(jì)動物實驗將形成開放性、區(qū)域性的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)3R是指:減少、替代、優(yōu)化。實驗動物按遺傳控制分為:近交系、封閉群、雜交群、突變系
實驗動物按微生物控制分為:普通、清潔、SPF、無菌動物。實驗動物許可證包括:生產(chǎn)和使用許可證我國實驗動物質(zhì)量保證體系包括:國家和地方的質(zhì)量檢測中心、國家種子中心、有關(guān)法令規(guī)章由科技部頒發(fā)的有關(guān)實驗動物的管理法規(guī):除《北京市實驗動物管理條例》
動物的外貌特征、毛色、品系名稱、生活習(xí)性、生物學(xué)特性、飼養(yǎng)管理注意、應(yīng)用領(lǐng)域、近交系或封閉群動物、
晝伏夜出動物、常年多發(fā)情動物、小鼠的發(fā)情周期所分階段、中國地鼠的近交系品系、判斷獼猴是否懷孕的方法、長爪沙鼠的別名、動物有什么樣的特性、爬行類的食性、鼠類的哺乳期均為21天全選
關(guān)于魚的生物學(xué)特性的說法、魚在腫瘤學(xué)研究的說法、蛙的應(yīng)用、馬的研究應(yīng)用、馬在遺傳病研究的應(yīng)用
全選。所有鼠類均屬于哺乳綱、嚙齒目。判斷雌性大小鼠交配過的方法:陰道涂片和陰道栓塞檢查雌性大小鼠只有在發(fā)情前期與發(fā)情期才接受交配行為。不能合成維生素C的是豚鼠與獼猴沒膽囊的動物:大鼠、中國地鼠。冬眠的動物:金黃地鼠、青蛙、旱獺、蟾蜍青蛙、蟾蜍的生產(chǎn)過程有變態(tài)現(xiàn)象。不適宜作為實驗用的豚鼠:除英國種外
家兔屬哺乳綱、兔形目。金黃地鼠的應(yīng)用:除不能用作糖尿病研究外。刺激性排卵的動物:家兔、貓有換毛現(xiàn)象的動物:兔、貓、鼠兔、犬。有假妊娠現(xiàn)象的動物:地鼠、兔
草食性動物:豚鼠、兔、鼠兔、長爪沙鼠。家兔靠耳、呼吸來散熱。犬與貓、都屬于哺乳綱、食肉目
犬的發(fā)情季節(jié):春、秋,屬于季節(jié)性發(fā)情;貓的發(fā)情季節(jié):春、秋、冬,也屬于季節(jié)性發(fā)情;除犬、貓外其他
動物都是常年多發(fā)情。獼猴屬哺乳綱、靈長目。有頰囊的動物:獼猴、地鼠長爪沙鼠屬于:哺乳綱、嚙齒目、倉鼠科。鼠兔的換毛季節(jié)一般在冬、夏季
旱獺屬于哺乳綱、嚙齒目、松鼠科?亢粑岬膭游铮喝、雞。豚鼠的別名:除黃耗子群居性好的動物:除兔。樹屬哺乳綱、靈長目,幼年樹對輪狀病毒不敏感
可用作人脫發(fā)研究的動物:樹、稀毛小鼠、裸鼠。雞屬于鳥綱、雞形目;鴿屬鳥綱、鴿形目貓與鴿的視覺很敏銳。魚在水中通過皮膚、鰓或肺進行氣體交換
牛、羊是草食性多胃動物,也是反芻動物,馬、兔則是草食性單胃動物。牛、羊、豬都是偶蹄目,馬屬奇蹄目變溫動物:魚、蛇。實驗動物病毒的分類、確診病毒的方法、傳染性疾病的危害、傳染病流行強度的形式、主
要消毒方式、寄生蟲引起的人畜共患病、寄生蟲檢測方法、水平傳播方式、垂直傳播的疾病全選
病毒性疾。毫餍刑攸c除B病毒(3)外,其余全選;對實驗的影響全選;臨床癥狀中除淋巴細(xì)胞性腦膜
炎、鼠肝炎、狂犬以及B病毒(3)外其余全選。
病毒:對酸堿的抵抗力差別大,對堿更敏感;對一般抗生素不敏感(錯的選項)
細(xì)菌分為螺旋菌、桿菌以及球菌;其生長需要氧氣、二氧化碳?xì)怏w。傳染鎖鏈:傳染源、傳播途徑以及易感動
60物。垂直傳播途徑:經(jīng)胎盤、卵及產(chǎn)道傳播。主要滅菌方式:熱、冷、Co輻照。小鼠淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)從腦膜炎主要癥狀:沒有皮膚型;人感染的癥狀:流感樣、腦膜炎
鼠肝炎的臨床癥狀:除嗜肺型肝炎病毒可引起肝壞死。犬瘟熱常用的免疫接種部位:皮下、肌肉
犬細(xì)小病毒的實驗室診斷:電鏡與免疫電鏡觀察、血凝和血凝抑制試驗?袢〉呐R床表現(xiàn):除極度喜飲水預(yù)防狂犬病措施:接種、一旦發(fā)病即報告病情及撲殺動物,消毒環(huán)境
犬病毒性肝炎分為:犬肝炎型、犬呼吸道型;其傳播途徑:消化道、外寄生蟲為媒介;檢測其抗體的方法:除
熒光法;其危害:不危及實驗人員,并不對所有溫血動物致。ㄈl(fā)病或死,改變酶系統(tǒng)及免疫反應(yīng))猴B病毒流行特點:除不同性別感染有差別;其臨床癥狀:除多數(shù)猴臨床癥狀明顯
細(xì)菌性疾。毫餍刑攸c中布氏桿菌、沙門菌以及支原體全選;臨床癥狀全選;對實驗的影響除支原體
(3)外全選;預(yù)防措施中結(jié)核、支氣管敗血波氏桿菌全選
泰澤氏病流行特點:除與氣候、飼料因素等無關(guān)。巴氏桿菌病臨床癥狀:除神經(jīng)性疾病支原體病病原體特征:除營養(yǎng)要求不高。支原體感染動物的影響:除動物大量死亡
肺炎克雷伯桿菌流行特點:除人不可感染。志賀氏菌病流行特點:除呈散在或地方流行支氣管敗血波氏桿菌病的病原菌:除支氣管波氏桿菌
棒狀桿菌病的流行特點:除各品種間無差異;其預(yù)防措施:除對動物定期預(yù)防接種沙門菌常見感染:鼠傷寒、腸炎沙門菌。實驗動物易感的支原體:除生殖支原體隔離措施主要用于:除將要死亡的動物。感染性設(shè)施的SOP包括全選
雞胚不能生產(chǎn)的疫苗:豬瘟、豬丹毒。真菌按形態(tài)學(xué)特點分為:絲狀及酵母狀真菌
致病性真菌中常見:淺部與深部真菌。真菌對機體的影響主要通過:直接影響和污染食物或飼料間接影響寄生蟲按對宿主的選擇性分為:單宿主和多宿主;按對宿主及部位的適應(yīng)性分為:固需和兼性寄生蟲;按寄生時間分為:暫時和永久寄生蟲;按寄生部位分為:體內(nèi)和體外寄生蟲
寄生蟲的成蟲和幼蟲寄生的宿主分別成為:終末宿主和中間宿主。寄生蟲感染的來源:中間宿主,墊料、水和飼料,傳播媒介。對寄生蟲的預(yù)防措施:驅(qū)蟲、環(huán)境衛(wèi)生及嚴(yán)格的管理制度。實驗動物真菌性疾。浩つw真菌感染、組織胞漿菌感染
實驗動物感染的真菌主要有:須發(fā)癬、小孢子菌。組織胞漿菌的實驗室確診:熒光抗體查咽喉分泌物、分離培養(yǎng)鑒定病原體。蠕蟲病的診斷:生前、死后診斷,死后診斷的手段:全身性蠕蟲剖解、個別臟器剖解
實驗動物血液寄生蟲主要伊氏錐蟲、焦蟲、住白細(xì)胞蟲。實驗動物糞原蟲檢測主要是對秋蟲卵囊及結(jié)腸小袋蟲的檢查。實驗動物中,小鼠、地鼠對弓形蟲最敏感;弓形蟲診斷:病原學(xué)、血清學(xué);治療:磺胺類藥物與抗菌增效劑合用效果好。兔球蟲分為:腸球蟲、肝球蟲;
常見體外寄生蟲:螨、虱、蚤等;實驗動物感染后會引起:貧血、繁殖力下降
健康動物通過:接觸患病動物或帶有螨蟲的用具而感染螨蟲;感染后的癥狀除皮膚發(fā)炎外還有劇癢、脫毛癢螨寄生于:皮膚表面和外耳道;疥螨寄生于:皮下、腹股溝及被毛深部血液寄生蟲易感動物:犬、貓;實驗動物常見血液寄生蟲有:鉤蟲、絲蟲對寄生蟲的防控,消除傳染源、切斷傳染途徑是行之有效的方法
大小鼠血液采集方法、猴采血方法、動物安樂死原則、實驗用藥的影響因素、對照的方法、動物實驗中注射方式、影響實驗結(jié)果的環(huán)境因素、動物晝夜變化的指標(biāo)、裸鼠的特征、一般藥理研究選用的動物、一般生殖毒性觀察的內(nèi)容、長期毒性的目的、影響實驗結(jié)果的動物因素、環(huán)境因素全選
染色法錯誤的是:除單一顏色可標(biāo)記1-10;染色常用的染色液:除10%的氨基黑溶液
常用編號方法:除拔毛法。去除被毛方法:除烙印法。注射用麻醉藥:除安定。豚鼠靜脈注射部位:除尾靜脈豬靜脈注射:耳靜脈、頸靜脈。大小鼠、豚鼠皮下注射:頸后肩胛間、腹部兩側(cè)
家兔皮下注射:背部、耳根部。家兔肌肉注射:除前肢肌肉。剪尾采血正確的:除大鼠每次可采2ml
眼眶后靜脈叢采血:除垂直從眼內(nèi)角刺入。犬常用采血方法:頭靜脈、小隱靜脈。集尿方法:除膀胱穿刺處死動物常用:除擊打烙印法。腫瘤研究選擇動物注意:除年齡、體重和性別
動物尿液:草食性:堿性、粘度高;肉食性:酸性、特殊臭味;高滲:陸地、沙漠生活的動物犬不適合眼和血管刺激試驗。適合進行外周循環(huán)觀察的動物及部位:除大鼠耳廓
嗎啡對小鼠、貓產(chǎn)生中樞興奮,其他動物為抑制。藥代動力學(xué)測定選用動物:犬、猴。藥物分布:小鼠、大鼠一般藥理研究觀察循環(huán)和呼吸不宜用:小鼠、兔。促智藥一般用:成年大小鼠
麻醉劑:的卡因、氯胺酮、水合氯醛;復(fù)蘇與搶救藥:美解眠、戊四氮、碳酸氫鈉、腎上腺素鎮(zhèn)痛藥:成年雄性大小鼠。無嘔吐反射:兔、大小鼠、豚鼠。利尿藥或抗利尿藥研究:大鼠、犬藥物對循環(huán)系統(tǒng)作用機制分析:貓、猴。生殖毒性包括:除哺乳期毒性
致畸敏感期毒性觀察:除雌性交配能力。圍產(chǎn)期毒性觀察:除胎仔的外觀、骨骼畸形。皮膚病研究:除青蛙動物模型意義、設(shè)計原則、誘發(fā)模型的種類、影響模型質(zhì)量的因素、裸大鼠用于腫瘤移植研究的優(yōu)勢全選T淋巴細(xì)胞功能缺陷:裸大鼠、裸小鼠。動物腫瘤誘發(fā)方式:原位、異位誘發(fā)
獲得遺傳工程動物的技術(shù)手段、轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用全選。已完成測序的哺乳動物:小鼠、人實驗動物微生物質(zhì)量控制的目的、無菌動物的特征全選
擴展閱讀:實驗動物總結(jié)
第一章緒論
1、實驗動物與實驗用動物
實驗動物:指經(jīng)人工培育,對其攜帶的微生物進行控制,遺傳背景明確,可用于科學(xué)實驗、藥品、生物制品的生產(chǎn)和檢定及其它科學(xué)研究的動物。
實驗用動物:一切可以用于實驗的動物。
區(qū)別:遺傳控制不同、微生物控制等級不同、培養(yǎng)的形質(zhì)和目標(biāo)不同。
2、按遺傳學(xué)控制標(biāo)準(zhǔn)即基因的純合成度,實驗動物分為:近交系-C3H、突變系-裸鼠、雜交群-F1、封閉群-昆明小鼠
3、實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化:對動物的質(zhì)量,繁育條件,實驗條件等方面規(guī)定的統(tǒng)一技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。內(nèi)容:實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量控制;實驗動物微生物學(xué)質(zhì)量控制;實驗動物設(shè)施環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)化;實驗動物飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化;
4、突變系動物:指正常染色體的基因發(fā)生了變異,具有一種或多種遺傳缺陷的動物。5、醫(yī)藥研究中動物選擇的原則:(1)選擇與人的機能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點相似的實驗動物;(2)選擇遺傳背景明確,得到良好微生物控制,具有模型性狀顯著且穩(wěn)定的LA;(3)選擇解剖、生理特點符合實驗?zāi)康囊蟮腖A;(4)選擇靶器官效應(yīng)好的LA;(5)選擇科研、檢定及生產(chǎn)中傳統(tǒng)使用的LA;(6)選擇具有特殊反應(yīng)性的實驗動物品種(系)。
第二章實驗動物質(zhì)量控制
1.1、相同基因類型動物:指所有個體的遺傳背景相同或相近的實驗動物。主要指近交系動物,其中包括同源突變近交系、同源導(dǎo)入近交系、重組近交系和雜交一代動物。
1.2、不同基因類型動物:指所有個體的遺傳背景具有較大差異的實驗動物,主要是指封閉群。1.3、品種、品系具備的條件:A.相似的外貌特征;B.獨特的生物學(xué)特性;C.穩(wěn)定的遺傳性能;D.共同的遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)。
1.4、近交系:指至少連續(xù)20代全同胞兄妹或親子交配,品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先,且近交系數(shù)達98.6%以上遺傳物質(zhì)高度純合和穩(wěn)定的遺傳群體。特征:基因純合性;同基因性;遺傳穩(wěn)定性;可識別性;表現(xiàn)型一致性;個體性;資料的可查性;國際分布的廣泛性。
1.5、近交衰退:指近交使生物個體的生活力、生產(chǎn)性能、群體均值、抗病力、適應(yīng)環(huán)境能力等都減退的現(xiàn)象。原因:(1)有害隱性基因的暴露;(2)多基因控制性狀平衡被破壞?刂品椒ǎ(1)控制近交系數(shù)F;(2)嚴(yán)格淘汰。
1.6、特殊類型的近交系A(chǔ).同源突變近交系:指某個近交系的某個指明位點的等位基因發(fā)生突變而分離出來的近交系亞系,它與原近交系的區(qū)別只是突變位點的基因不同而已(如:裸鼠)。
B.同源導(dǎo)入近交系:指通過雜交-互交或回交等方式將一個差異基因?qū)氲侥硞近交系中,由此形成的一個近交系,該近交系與原來近交系只是一個很小染色體片斷上的基因不同。
C.重組近交系:由兩個高度無關(guān)的近交系雜交產(chǎn)生F2代后,再從F2代中隨機選擇個體配對,連續(xù)進行20代以上全同胞兄妹交配而育成的一個近交系列動物。為重組近交系提供親代的兩個近交系稱為祖系。特點:具有其雙親品系的特征;具有重組后一組內(nèi)和每個重組近交系的特征,并具有新的多態(tài)性基因位點;和近交系一樣具有極高的純合性。
D.雜交一代(又稱F1代):用2個基因型不同的近交系動物相互交配產(chǎn)生的第一代動物,即為F1代動物。(雜交F1代動物不是一個品種或品系,因為它不具有育種功能)。特點:具有遺傳和表型一致性;基因型一致;與近交系相比具有雜交優(yōu)勢;國際分布廣泛;F1代動物品質(zhì)的好壞完全取決于2個親代。
1.7、封閉群:在不從外部引入新的血緣條件下,以非近親交配的方式至少連續(xù)繁殖4代以上的群體。特點:A.封閉群動物避免了近親交配,具有較強的繁殖力和生活力;B.封閉群動物具有類似于人類群體遺傳異質(zhì)性的遺傳組成;C.封閉群動物中存在有模型價值的突變基因,通?蓪(dǎo)致動物某些方
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面的異常;D.封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性;E.封閉群動物因其攜帶大量的隱性有害基因,可用于估計群體對自發(fā)或誘發(fā)突變的遺傳負(fù)荷能力。
2.1、按微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)分級(4級五種):國際分三級(普通級、無特定病原體動物、無菌動物),我國分四級(清潔動物)。
普通級動物:指飼養(yǎng)在普通環(huán)境中,在微生物控制上要求最低的動物,它要求不攜帶人獸共患病和動物烈性傳染病的病原。
清潔動物:除不帶有普通級動物應(yīng)排除的病原外,還不應(yīng)攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原。
無特定病原體動物:指動物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在,但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。
無菌動物:指用現(xiàn)有的檢測技術(shù)在動物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲的動物。
悉生動物GN:指在無菌動物體內(nèi)植入已知微生物的動物。
2.2、感染病原微生物的危害:引起實驗動物的疾病和死忙;干擾動物實驗結(jié)果;人獸共患。挥绊懮镏破返馁|(zhì)量。
2.3、主要的人獸共患傳染病5和烈性傳染病的臨床癥狀2
流行性出血熱EHF:人感染表現(xiàn)高熱、低血壓、少尿、多尿與恢復(fù)期五期臨床特征;實驗大鼠和野鼠感染不表現(xiàn)臨床癥狀,無病理變化。
淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎LCM:鼠出現(xiàn)癥狀與毒株、鼠齡、品系和感染途徑有關(guān),可表現(xiàn)為大腦型、內(nèi)臟型和發(fā)育不良型,但一般為隱性感染;人感染后表現(xiàn)為流感樣癥狀或腦膜炎,預(yù)后良好。
狂犬病:狂暴型可分三個時期(前驅(qū)期、興奮期、麻痹期);麻痹型全身肌肉麻痹,始見于頭部肌肉,表現(xiàn)吞咽困難,隨后四肢麻痹,最終全身麻痹而死亡;病理學(xué)表現(xiàn)為非化膿性腦炎和神經(jīng)炎。
猴B病毒。汉锔腥綛病毒后,初期在舌表面和口腔粘膜與皮膚交界的唇緣有皰疹,最后形成潰瘍表面,有纖維素性壞死痂皮,7-14天自愈,不留疤痕;人感染后癥狀非常嚴(yán)重,主要呈上行性脊髓炎或腦脊髓炎,死亡率高。
結(jié)核TB:猴一般不出現(xiàn)臨床癥狀,嚴(yán)重時可見咳嗽、消瘦,呼吸困難,聽診有音,體溫升高不明顯,X線檢查可見明顯的結(jié)核陰影;淋巴結(jié)腫大、脾和肝腫大,形成彌散性的黃白色干酪樣病灶;皮膚可出現(xiàn)結(jié)核性結(jié)節(jié),有滲出物。
鼠痘:急性致死型:多見于初次發(fā)病的鼠群,患鼠于4-12小時死亡;病理變化可見肝壞死嚴(yán)重,脾、腸也有壞死灶。亞急性型-慢性經(jīng)過型:出現(xiàn)皮疹,潰爛、壞死,以四肢、頭尾最為嚴(yán)重。無癥狀耐過型:動物外觀健康無病變,但在小鼠體內(nèi)有病毒增殖。
兔出血癥RHD:急性型:無任何癥狀突然死亡,有時鼻腔流出血性分泌物。亞急性型:食欲驟減,體溫高達41℃以上,呼吸困難,鼻腔流出血性分泌物。慢性型:一般發(fā)生在流行的后期,病兔精神欠佳,病程較長,最后衰弱而死或耐過而恢復(fù),成為帶毒者。
3.1、實驗動物環(huán)境:指實驗動物生長發(fā)育、繁殖交配、實驗處理等賴以生存的所有外部條件的總和。(氣候因素、理化因素、生物因素、居住因素、營養(yǎng)因素)
3.2、根據(jù)微生物控制程度的不同將動物設(shè)施分為三類:
普通(開放)環(huán)境:符合動物居住的基本要求;不能完全控制傳染因子;適用于飼育教學(xué)等用途的普通級實驗動物;該設(shè)施內(nèi)空氣與外界環(huán)境相通,但有必要的防野鼠、蚊蠅設(shè)施。
屏障環(huán)境:適用于飼育清潔級及無特定病原體(SPF)實驗動物;進入系統(tǒng)的空氣應(yīng)經(jīng)過初、中、高效三級過濾;空氣的潔凈度達到萬級;進入設(shè)備的動物、飼料、水、墊料、實驗用品均需有嚴(yán)格的微生物控制;人員須經(jīng)淋浴、更換滅菌服方可進入室內(nèi)。
隔離環(huán)境:采用無菌隔離裝置以保證無菌或無外來污染;隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備均為無菌,動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng);該系統(tǒng)既能保證與外環(huán)境的絕對隔離,又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持與內(nèi)環(huán)境的一致;該設(shè)施適用于飼育SPF、悉生及無菌動物。
3.3、感染動物實驗設(shè)施生物危害程度分級(四級):
危害等級Ⅰ(低個體危害,低群體危害):不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的生物因子。
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危害等級II(中等個體危害,有限群體危害):引起人或動物發(fā)病,但一般不會引起嚴(yán)重危害的病原體。
危害等級III(高個體危害,低群體危害):引起人類或動物嚴(yán)重疾病,傳染性不強,有有效的治療藥物。
危害等級IV(高個體危害,高群體危害):引起人或動物非常嚴(yán)重的疾病,一般不能治愈,容易在人與動物間相互傳播。
3.4、人員、物品進入屏障設(shè)施的流程
人員:更衣-淋浴-更滅菌衣-潔凈走廊-動物實驗室-污染走廊-洗消室-更衣-外部。物品:雙扉高壓蒸汽滅菌器-帶紫外線消毒的傳遞窗-盛滿消毒液的不銹鋼渡槽。
動物:引入的動物應(yīng)為相同的等級;引進的動物需有明確的動物品種/系、性別、數(shù)量、出生日期和質(zhì)量合格證及遺傳背景資料等;動物到達后應(yīng)先檢查運輸盒的密封材料的完整性;驗收后,按以下順序?qū)游飩魅耄簞游?專用包裝盒)-傳遞窗-檢疫室-清潔走廊-飼育室或?qū)嶒炇遥?實驗后或生產(chǎn)供應(yīng))(經(jīng)包裝)污染走廊外部。
3.5、實驗動物環(huán)境空氣潔凈度要求:普通環(huán)境(無)、屏障環(huán)境(1萬)、亞屏障環(huán)境(10萬)、隔離環(huán)境(100)
4.1、營養(yǎng)素:指生物體為了維持生命而從外界以食物形式攝入的必需物質(zhì)。
4.2、營養(yǎng)需要:為滿足動物維持正常生長和繁殖所需的各種營養(yǎng)素的需要量。根據(jù)動物的品種、年齡及生理狀態(tài)將其營養(yǎng)需要分為生長、繁殖和維持三種。
4.3、飼料常用消毒法:干熱法(80~100℃烘烤,營養(yǎng)成分損失多)、高溫高壓法(121℃
60/1.0Kg/cm2/15min,營養(yǎng)成分損失少,但維生素破壞多)、Co照射法(營養(yǎng)成分損失少,費用高)。
在飼料學(xué)中,賴氨酸被稱為第一限制性AA,蛋氨酸則被稱為第二限制性AA。
第三章常用實驗動物的特性
屬于嚙齒類動物的有:大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠屬于食草類動物的有:豚鼠、兔
不能自行合成維生素C的有:豚鼠、猴子無膽囊的有:大鼠、中國地鼠有頰囊的有:地鼠、猴子刺激性排卵的是:兔1、小鼠生物學(xué)特性:(1)全身被毛,面部尖突,尾部被有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片;(2)體型小,生長快,易于飼養(yǎng)管理;(3)性情溫馴,膽小怕驚,對外界反應(yīng)敏感;(4)成熟早,繁殖力強:一般雌鼠在35~45日齡、雄鼠在45~60日齡性成熟;一般每胎產(chǎn)仔數(shù)6~15只,1年產(chǎn)仔胎數(shù)6~10胎;壽命2~3年;(5)喜歡光線較暗的安靜環(huán)境,晝伏夜出;(6)喜群居并喜啃咬。
【A.小鼠的下頜骨的喙?fàn)钔惠^小,髁狀突發(fā)達,運用下頜骨形態(tài)的分析技術(shù),可進行近交系小鼠遺傳監(jiān)測;B.小鼠灌胃給藥的劑量一般不超過1.0ml;C.成年雌鼠交配后陰道口有白色的陰道栓,這是受孕開始的標(biāo)志;D.小鼠為全年多發(fā)情動物,發(fā)情周期可分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和發(fā)情休息期四個階段,每個階段陰道黏膜均發(fā)生典型變化,通過陰道涂片可判斷處于哪個階段】
2、小鼠的應(yīng)用:(1)藥物研究;(2)病毒、細(xì)菌和寄生蟲病學(xué)研究;(3)腫瘤學(xué)研究;(4)遺傳學(xué)研究;(5)免疫學(xué)研究;(6)其他
3、大鼠生物學(xué)特性:(1)外貌與小鼠相似,但體型較大,尾上覆有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片;(2)晝伏夜動,雜食;(3)性情較兇猛,尤其是哺乳期容易咬人,成年大鼠抗病力較強;(4)對空氣中的灰塵、氨、硫化氫極為敏感;(5)對噪音敏感;(6)對營養(yǎng)缺乏非常敏感;(7)對濕度要求嚴(yán)格,如濕度低于40%時,易發(fā)生環(huán)尾。唬8)肝切除60%~70%后可再生,無膽囊,不能嘔吐。
4、大鼠的應(yīng)用:(1)大鼠是肥胖研究的模型動物;(2)大鼠是高血壓研究的模型動物;(3)大鼠是神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的模型動物;(4)藥物研究。
5、豚鼠生物學(xué)特性:(1)豚鼠體形短粗,無尾,四肢較短,耳殼較薄,上唇分裂;(2)性情溫順,
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膽小易驚,喜群居和干燥清潔的生活環(huán)境,聽覺較發(fā)達;(3)對抗生素極為敏感;(4)牙齒能終生生長;(5)出生被毛。
6、豚鼠的應(yīng)用:(1)免疫學(xué)研究;(2)微生物感染試驗;(3)局部皮膚毒物作用的實驗;(4)藥物研究;(5)耳科研究(聽力特別敏銳);(6)營養(yǎng)學(xué)研究:研究維生素C生理功能的重要動物模型;(7)復(fù)制典型的急性肺水腫動物模型;(8)豚鼠缺氧耐受力強,是缺氧耐受性和測量耗氧量研究的首選動物。
7、地鼠生物學(xué)特性:(1)屬嚙齒類動物,雌鼠比雄鼠體型大;(2)有頰囊,尾短,嗜睡;(3)金黃地鼠成熟早,妊娠期短,氣溫在8~9℃時出現(xiàn)冬眠;(4)中國地鼠無膽囊,染色體數(shù)目少。
常用品種品系:金黃地鼠;中國地鼠(易自發(fā)糖尿。8、地鼠的應(yīng)用:(1)腫瘤學(xué);(2)生殖生理研究;(3)遺傳學(xué)研究;(4)傳染病研究;(5)糖尿病研究。
9、兔的生物學(xué)特性:(1)屬兔形目,具有夜行性;(2)膽小怕驚,嗅覺、聽覺靈敏;(3)喜獨居,厭濕喜干,耐寒怕熱;(4)屬草食動物,有食糞性;(5)腸道有圓小囊,后肢的淋巴結(jié)較大;(6)有眶下腺,甲狀旁腺較分散;(7)頸部減壓神經(jīng)獨立行走,胸腔結(jié)構(gòu)特殊;(8)體溫反應(yīng)靈敏,耳大,血管清晰;(9)屬刺激性排卵動物
常用品種品系:日本大耳白兔、新西蘭兔(最常用的實驗兔)、青紫蘭兔(用于某些生物制品的檢驗)、中國白兔(主要用于教學(xué)實驗)
10、兔的主要應(yīng)用:(1)發(fā)熱研究和熱原實驗;(2)免疫學(xué)研究;(3)皮膚反應(yīng)試驗;(4)眼科學(xué)研究;(5)心血管疾病和肺心病研究;(6)生殖生理及胚胎學(xué)研究
11、犬的生物學(xué)特性:(1)喜近人,易飼養(yǎng),歸家性強;(2)喜食肉,春秋兩季發(fā)情;(3)嗅覺、聽覺靈敏;(4)無精囊腺,前列腺發(fā)達;(5)汗腺不發(fā)達,鼻尖濕潤;(6)有5種血型,4種神經(jīng)類型;(7)視力差,紅綠色盲;(8)壽命為10-20年。
12、犬的應(yīng)用:(1)實驗外科;(2)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究;(3)慢性實驗;(4)藥理、毒理學(xué)研究13、小型豬生物學(xué)特性:屬偶蹄動物;豬和人的皮膚結(jié)構(gòu)很相似;豬和人的心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)相似。
主要品種:西藏小型豬、西雙版納小耳豬(近交系)3、貴州小型香豬14、小型豬的應(yīng)用:(1)皮膚燒傷的研究;(2)心血管病的研究
15、獼猴的生物學(xué)特性:屬靈長類動物,喜群居;屬雜食性動物,有頰囊,體內(nèi)不能合成維生素C;視力好,聽覺靈敏,嗅覺差;各器官系統(tǒng)與人相似,有月經(jīng)。
常用品種:恒河猴
16、獼猴的應(yīng)用:傳染病學(xué)研究;生理、藥理和器官移植研究17、實驗動物的妊娠期與性周期
小鼠:性周期為4~5天、妊娠期一般為19~21天,哺乳期一般為20~22天大鼠:雌鼠性周期為4~5天、妊娠期為19~23天豚鼠:性周期為13~20天,妊娠期長達65~70天
金黃地鼠:性周期30-32天,妊娠期14-17天,是妊娠期最短的哺乳類實驗動物兔:性周期約為15-16天
第五章動物模型
1、人類疾病動物模型:是指生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中所建立的具有人類疾病模擬性表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料。
意義:A.避免了在人類身上進行實驗所帶來的風(fēng)險;B.臨床上少見的疾病可隨時進行復(fù)制;C.可以克服人類某些疾病潛伏期長、病程長和發(fā)病率低的缺點;D.可以嚴(yán)格控制實驗的條件,增強實驗材料的可比性;E.可以簡化實驗操作和樣品采集;F.有助于更全面地認(rèn)識疾病的本質(zhì)。
分類:誘發(fā)性或?qū)嶒炐詣游锬P、自發(fā)性動物模型、陰性動物模型、孤立動物模型2、動物模型設(shè)計原則:相似性、重復(fù)性、可靠性、適用性和可控性、易行性和經(jīng)濟性
3、誘發(fā)性動物疾病模型:指用物理的、化學(xué)的或生物的致病因素作用于動物,造成動物組織、器
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官或全身一定的損害,出現(xiàn)某些類似人類疾病引起的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變,即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類某種疾病。
優(yōu)點:制作方法簡便,實驗條件比較簡單,其它因素容易控制,在短時間內(nèi)可以復(fù)制大量的動物模型。
缺點:誘發(fā)動物模型與人類自然產(chǎn)生的疾病在某些方面存在差異。
4、自發(fā)性動物模型:指實驗動物未經(jīng)任何人工處置,在自然條件下所發(fā)生的疾病或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物疾病模型。自發(fā)性動物模型以遺傳疾病和腫瘤居多。
優(yōu)點:疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很相似,均是在自然條件下發(fā)生的疾病,應(yīng)用價值很高
缺點:種類有限,飼養(yǎng)條件要求高,尚不能普遍應(yīng)用
5、轉(zhuǎn)基因動物模型:是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物
6、制備轉(zhuǎn)基因動物模型常用技術(shù):顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)、基因打靶技術(shù)、體細(xì)胞克隆技術(shù)。
基因打靶是指外源DNA與受體細(xì)胞染色體上的DNA靶序列之間發(fā)生序列依賴的同源重組,替代靶序列并整合在預(yù)定的特異位點,從而改變細(xì)胞遺傳特性的遺傳操作方法。
7、遺傳工程動物:人為地運用轉(zhuǎn)基因技術(shù)、基因敲除、轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植技術(shù)、ENU大規(guī)模誘變技術(shù)等,有目的地在基因水平改造動物的遺傳物質(zhì)組成,導(dǎo)致動物新性狀的出現(xiàn),并使其能有效地遺傳下去,形成新的可供生命科學(xué)研究和其它目的所用的動物模型。
主要用途:A.遺傳工程動物與基因功能研究;B.遺傳工程動物與人類疾病動物模型;C.遺傳工程動物與生物活性物質(zhì)生產(chǎn);D.遺傳工程動物與異種移植器官的生產(chǎn)。
8、模式生物:作為實驗?zāi)P鸵匝芯可F(xiàn)象的基本規(guī)律或研究人類健康問題的動物、植物和微生物。
9、免疫缺陷動物:是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。
分類:先天性免疫缺陷動物(T淋巴細(xì)胞功能缺陷動物:裸鼠;B淋巴細(xì)胞功能缺陷動物:CBA/N小鼠;NK細(xì)胞功能缺陷動物:Beige小鼠;聯(lián)合免疫缺陷動物:SCID小鼠)、獲得性免疫缺陷動物(AIDS模型)
10、裸小鼠主要特征:(1)無毛、裸體、無胸腺;(2)隨著鼠齡增長,皮膚變薄,頭頸部皮膚皺褶,發(fā)育遲緩;(3)細(xì)胞免疫力低下;(4)無接觸敏感性,無移植排斥;(5)粒細(xì)胞數(shù)量比普通小鼠少;(6)成年裸鼠NK細(xì)胞活性高于普通小鼠,幼鼠低于普通小鼠;(7)B淋巴細(xì)胞數(shù)量正常但功能發(fā)揮有所限制;(8)抵抗力差,易患病毒性肝炎和肺炎;(9)純合型雌裸鼠受孕率低,乳腺發(fā)育不良;(10)實驗用裸鼠年齡選擇:4-8周齡
11、SCID小鼠的基本特征:(1)外觀與普通小鼠無異,體重發(fā)育正常,但胸腺、脾、淋巴結(jié)的重量一般均不及正常的30%,組織學(xué)上表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞顯著缺乏;(2)胸腺沒有皮質(zhì)結(jié)構(gòu),僅殘存髓質(zhì);(3)脾小體無淋巴細(xì)胞聚集;(4)淋巴結(jié)無明顯皮質(zhì)區(qū),副皮質(zhì)區(qū)缺失,呈淋巴細(xì)胞空脫狀,由網(wǎng)狀細(xì)胞所占據(jù);(5)骨髓結(jié)構(gòu)正常,外周血白細(xì)胞較少;(6)T、B細(xì)胞大大減少,細(xì)胞和體液免疫功能均缺陷;(7)巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、LAK細(xì)胞功能均未受影響,呈正常狀態(tài)。
12、SCID-hu小鼠:由于SCID小鼠缺乏有效的免疫系統(tǒng),通過移植人免疫組織或免疫細(xì)胞,使SCID小鼠具有了人類部分免疫系統(tǒng),稱為SCID-hu小鼠。
第六章動物福利
1、動物福利:指人為地給動物提供適宜的物質(zhì)條件以保證動物在健康舒適的狀態(tài)下生存、生理和心理愉快的感受狀態(tài)。對象:實驗動物、野生動物、娛樂動物、經(jīng)濟動物等,不包括害蟲。
2、動物享受的五大自由:享有不受饑渴的自由;享有生活舒適的自由;享有無恐懼和悲傷的自由;享有不受痛苦、傷害和疾病折磨的自由;享有表達天性的自由。
3、3R原則及意義:優(yōu)化:使用新的有效的鎮(zhèn)痛劑、麻醉劑或改進實驗程序、優(yōu)化實驗操作,從而減少動物在實驗過程中的痛苦。
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減少:選用恰當(dāng)實驗動物進行規(guī)范化動物實驗、提高實驗動物利用率,以減少動物使用量。替代:應(yīng)用微生物或細(xì)胞、組織、器官,亦可用低等動物代替,甚至計算機模擬代替整體動物實驗。
“3R運動”的推進,將使實驗動物的使用量逐漸減少,動物實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性不斷提高。4、安死術(shù):即安樂死術(shù),是指以人道的方法處死動物過程。在處死動物的過程中盡量減少動物的驚慌、焦慮,使其安靜地、無痛苦地死亡。
第七章動物實驗設(shè)計
1、動物實驗設(shè)計應(yīng)遵循的原則:對照的原則、隨機化原則、重復(fù)的原則、一致性原則、彈性原則、最經(jīng)濟原則。
2、常用動物實驗設(shè)計方法:單組比較設(shè)計、配對比較設(shè)計、完全隨機設(shè)計、隨機區(qū)組設(shè)計、拉丁方設(shè)計、正交設(shè)計。
3、實驗動物選擇基本原則:
相似性原則:利用動物與人類某些機能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點的相似性選擇實驗動物。(豬-燒傷實驗;犬-藥理毒理學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、行為學(xué)、外科學(xué)研究;獼猴-避孕藥;家兔-避孕藥;齒式-豬;遺傳性高血壓大鼠、糖尿病小鼠、猴對痢疾桿菌敏感)
特殊性原則:是指利用不同種系實驗動物機體存在的特殊構(gòu)造或某些特殊反應(yīng)選擇解剖、生理特點符合實驗?zāi)康暮鸵蟮膭游铩#ù笫鬅o膽囊;家兔對體溫變化敏感;豚鼠不能合成維C;大鼠垂體腎上腺功能發(fā)達)
標(biāo)準(zhǔn)化原則:指選擇和使用與研究內(nèi)容相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物。規(guī)格化原則:指選擇與實驗要求一致的動物規(guī)格。
經(jīng)濟性原則:指在不影響實驗質(zhì)量的前提下,盡量選用最易獲得、最經(jīng)濟、最易飼養(yǎng)管理的動物。
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