微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

食品衛(wèi)生綜合檢驗(yàn)試驗(yàn)總結(jié)

食品質(zhì)量091金秀建201*016521

為期五天（201*年6月11日-15日）的食品衛(wèi)生綜合檢測(cè)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)告一段落了，在這一周的微生物實(shí)驗(yàn)主要包括牛奶中大腸菌群的計(jì)數(shù)、雞蛋中沙門氏菌的檢驗(yàn)和牛奶中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)三個(gè)實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過三個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)的課程，能讓我更能理解試驗(yàn)時(shí)要掌握的細(xì)節(jié)，也要保持頭腦的時(shí)刻清醒。同時(shí)讓我對(duì)這三種微生物有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，同時(shí)讓我也對(duì)實(shí)驗(yàn)也更加熟悉了。

首先我們做的是大腸菌群的計(jì)數(shù)，它是采用MPN（最大可能數(shù)法）的計(jì)數(shù)來測(cè)定的。大腸菌群的特性為：在37℃，24小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，好氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。其檢測(cè)原理為細(xì)菌在樣品內(nèi)的分布是隨機(jī)的，所以檢測(cè)細(xì)菌時(shí)，可按概率理論計(jì)算菌數(shù)。大腸菌群MPN計(jì)數(shù)的檢驗(yàn)程序?yàn)闃悠返南♂�、初發(fā)酵試驗(yàn)、復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)和最后的大腸菌群最可能數(shù)(MPN)的報(bào)告。那么在第一天的上午，老師基本給我們講了實(shí)驗(yàn)的原理和步驟，以及一些需要注意的地方，我們便開始計(jì)算自己需要配制的實(shí)驗(yàn)試劑的量，并且稱取試劑的量和清洗所要用的實(shí)驗(yàn)器皿，首先配置的是生理鹽水和LST肉湯，并且把生理鹽水和LST肉湯分裝到試管內(nèi)，蓋好蓋子包扎好進(jìn)行滅菌，滅完菌也就到了吃飯時(shí)間，等下午來接種培養(yǎng)了。

牛奶樣品與生理鹽水以1:9的比例進(jìn)行混合，搖勻后做10倍系列的稀釋，做了3個(gè)稀釋度。隨后將三個(gè)稀釋度的樣品勻液以每個(gè)稀釋度3支試管接種到內(nèi)裝小導(dǎo)管的含LST肉湯的試管中，最后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。在經(jīng)過24h的培養(yǎng)后，所有的試管內(nèi)均產(chǎn)生氣體，而后我們要將培養(yǎng)后的有菌落的LST肉湯接種到BGLB肉湯試管中進(jìn)行培養(yǎng)24-48h，觀察后發(fā)現(xiàn)所有的BGLB管都產(chǎn)氣，顏色也有原來的綠色變成暗黃色，證明也產(chǎn)生了酸，所以記為所有產(chǎn)氣管為大腸菌群陽性管。最后查MPN表可得出每毫升樣品中大腸菌群的MPN為大于等于1100ml/MPN。

我們小組在做大腸菌群測(cè)定還是很順利的，中途沒有出現(xiàn)什么錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)很順利，小組成員的配合和分工也都很好。

第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是雞蛋中的沙門氏菌的檢測(cè)，他的特性是：沙門氏菌需氧或兼性厭氧，10-42℃都可生長(zhǎng)，最適溫度為37℃，大部分可發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，是革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。在營養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)產(chǎn)生光滑，濕潤，半透明，邊緣整齊的菌落。在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)，形成大小中等的灰白色菌落。實(shí)驗(yàn)過程可分為前增菌、選擇性增菌、選擇性平板分離、生物化學(xué)篩選四個(gè)階段。

實(shí)驗(yàn)首先配制BPW溶液，進(jìn)行分裝和高壓滅菌，在無菌條件下，移取5ml雞蛋液樣品于盛有45mlBPW的組織培養(yǎng)瓶中，混勻，放置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h，觀察生長(zhǎng)現(xiàn)象。接下來的增菌階段，需要配制TTB增菌液和SC增菌液，移取1ml的前增菌液接種到10mlTTB增菌液內(nèi)，在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h～24h，SC增菌液過程與TTB一樣。接下來需要制備BS平板和HE平板，等平板凝固后便可以開始接種了，是采用平板分多區(qū)劃線的方法，然后放在37度溫箱培養(yǎng)18~24h。最后要進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)，要先配制三糖鐵瓊脂，從培養(yǎng)皿的平板上挑取可疑菌落，接種到三糖鐵瓊脂，先與底層穿刺，再在斜面劃線。同時(shí)把菌落接種到各種生化試劑里，封口后一起放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h。取出培養(yǎng)皿和生化小試管觀察結(jié)果，記錄。

第三個(gè)實(shí)驗(yàn)是金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)，它的特性一般是無芽孢，鞭毛。大多數(shù)無莢膜，革蘭氏染色陽性，它培養(yǎng)的營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上就能生長(zhǎng)良好，需氧或兼性厭氧。在血平板上培養(yǎng)會(huì)使紅細(xì)胞破裂，形成透明的溶血環(huán)。在顯微鏡下可以看到是紫色的，排列成葡萄狀的圓形的菌。

首先是樣品的處理，稱取22g7.5%氯化鈉肉湯溶解于250ml水中，在每個(gè)均質(zhì)瓶?jī)?nèi)移取45ml，同時(shí)制取Baird-Parker培養(yǎng)基，高壓滅菌后吸取牛奶樣品5ml到均質(zhì)瓶?jī)?nèi)。放入恒溫箱培養(yǎng)18-24h。然后用接種環(huán)取培養(yǎng)物分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板上，培養(yǎng)18-24h，Baird-Parker平板有可能需要培養(yǎng)45-48h。最后進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)，挑取BP平板或血平板上可疑菌落1個(gè)或以上，分別接種到5ml左右BHI肉湯中，36±1℃培養(yǎng)18-24h。取新鮮兔血漿0.5ml，加入BHI培養(yǎng)物0.2-0.3ml，振蕩搖勻，置36±1℃溫箱培養(yǎng)，半小時(shí)觀察一次，6小時(shí)觀察，直至出現(xiàn)凝固，判為陽性結(jié)果。也有小組6h后也沒凝固的，則判為陰性。最后進(jìn)行革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)，觀察細(xì)菌的形態(tài)特征。最后記錄結(jié)果。

三個(gè)實(shí)驗(yàn)雖然不多，但是三個(gè)實(shí)驗(yàn)的跨度剛好是一個(gè)星期，所以我們實(shí)驗(yàn)剛好可以做完，實(shí)驗(yàn)從剛開始的懵懂到慢慢的熟悉，到最后的成功，少不了的是小組合作和老師的幫助。經(jīng)過三個(gè)微生物的實(shí)驗(yàn)，讓我對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)的過程。不過對(duì)于微生物的實(shí)驗(yàn)一定要細(xì)心，一個(gè)是它需要的時(shí)間很長(zhǎng)，要滅菌和培養(yǎng)，如果做錯(cuò)都得重新再來，并且實(shí)驗(yàn)過程中不能被污染，否則會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的污染或完全不可用。對(duì)實(shí)驗(yàn)流程一定要熟悉，現(xiàn)象一定要觀察仔細(xì)，因?yàn)轭愃频木�類有很多，其生產(chǎn)的習(xí)性也類似，若不觀察仔細(xì)，就會(huì)有結(jié)果的偏差。我們小組的實(shí)驗(yàn)都很順利，中途雖有一點(diǎn)點(diǎn)過失，但對(duì)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)度和結(jié)果沒有什么大的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也是讓我們蠻有成就感的，感謝小組的配合。操作不像理論，只有多次練習(xí)才有體會(huì)，在今后的實(shí)驗(yàn)中，我會(huì)更加努力。

擴(kuò)展閱讀：微生物實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)

微生物實(shí)驗(yàn)心得

姓名：關(guān)琦琦學(xué)號(hào)：09070401048班級(jí)：生物科學(xué)09-2班指導(dǎo)老師：吾爾恩微生物實(shí)驗(yàn)心得

本學(xué)期已臨近尾聲，我們即將告別微生物實(shí)驗(yàn)這門課程，在這一學(xué)期，八個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)中，我們學(xué)到了許多知識(shí)，這些知識(shí)將會(huì)陪伴我們一生，下面我們就來通過一些實(shí)驗(yàn)來回顧一下本學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)。

我選取的實(shí)驗(yàn)是《環(huán)境因素對(duì)微生物的影響》，之所以選擇這則實(shí)驗(yàn)是因?yàn)檫@則實(shí)驗(yàn)比較簡(jiǎn)單，而且涉及面非常多。首先我們來分析一下這則實(shí)驗(yàn)所涉及到的知識(shí)面。環(huán)境對(duì)微生物生長(zhǎng)影響主要分以下幾種

溫度：通過影響蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)入細(xì)胞膜的流動(dòng)性及完整性來影響微生物的生長(zhǎng)、繁殖和新陳代謝。微生物群體生長(zhǎng)、繁殖最快的溫度為其最適生長(zhǎng)溫度。

PH:H+影響菌體細(xì)胞質(zhì)膜上電荷性質(zhì)，微生物吸收物質(zhì)變化，影響代謝，高濃度H+或引起菌體表而蛋白質(zhì)和核酸水解以及影響酶和活性.

滲透壓：微生物在等滲溶液中可正常生長(zhǎng)繁殖；在高滲溶液中細(xì)胞失水，生長(zhǎng)受到抑制；在低滲溶液中，細(xì)胞吸水膨脹，因?yàn)榇蠖鄶?shù)微生物具有較為堅(jiān)韌的細(xì)胞壁，細(xì)胞一般不會(huì)裂解，可以正常生長(zhǎng)，但低滲溶液中溶質(zhì)含量低，在某些情況下也會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。

抗生素：在自然界中普遍存在微生物間的拮抗作用，許多微生物可以產(chǎn)生抗生素，能選擇性的抑制或殺死其他微生物。

微生物的實(shí)驗(yàn)其實(shí)簡(jiǎn)單來說步驟幾乎相同：制作培養(yǎng)基、倒平板、接種微生物、培養(yǎng)、觀察菌種生長(zhǎng)情況從而得出結(jié)論。本次實(shí)驗(yàn)也是這樣首先制作培養(yǎng)基，在進(jìn)行倒平板步驟時(shí)，對(duì)平板環(huán)境進(jìn)行區(qū)分，然后進(jìn)行接種。

在進(jìn)行倒平板的時(shí)候，要注意在無菌條件下進(jìn)行倒置，同時(shí)也要保持平板的厚度均勻。

在進(jìn)行菌種接種的時(shí)候，選擇合適的劃線方式，一般是選擇Z字形劃線法，注意不要把平板弄破，等到平板凝固后才可以進(jìn)行接種。接種時(shí)也要注意在無菌條件下接種。經(jīng)過培養(yǎng)后，再觀察最后得出結(jié)論。

通過一學(xué)期的實(shí)驗(yàn)，我越發(fā)的明白實(shí)驗(yàn)操作對(duì)于結(jié)果的重要性。實(shí)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)操作可以說是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵部分，可是馬虎不得。對(duì)于需要團(tuán)隊(duì)合作的實(shí)驗(yàn)，個(gè)人認(rèn)為要有強(qiáng)勢(shì)的人員搭檔，不說是精通實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，最少也得知道實(shí)驗(yàn)的基本操作，掌握要做實(shí)驗(yàn)的操作方法，這對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)無疑是與決定性作用的。對(duì)于個(gè)人的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Γ�關(guān)鍵還是要看平時(shí)的積累，有些實(shí)驗(yàn)操作繁瑣復(fù)雜，需要極大的耐心，這些都應(yīng)該是逐漸培養(yǎng)起來的。最后，簡(jiǎn)單談一下自己在微生物實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)的心得體會(huì)。剛開始的時(shí)候，最令我頭痛的就是培養(yǎng)基的配制、消毒滅菌，培養(yǎng)基的配制和消毒與滅菌兩個(gè)實(shí)驗(yàn)可以說是微生物實(shí)驗(yàn)的最近本課程，內(nèi)容有配制培養(yǎng)基、分裝培養(yǎng)基、為下次試驗(yàn)準(zhǔn)備菌種及無菌器材等，內(nèi)容顯得非常繁多緊湊，需要準(zhǔn)備的器材、藥品及用具較多、較雜、較細(xì)。最后只能是提前參照微生物實(shí)驗(yàn)教材，將實(shí)驗(yàn)過程中所涉及到的藥品、器材及儀器等統(tǒng)統(tǒng)羅列出來，計(jì)算出實(shí)驗(yàn)時(shí)大小材料需用的數(shù)量，這樣，一方面可以有效避免在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)遺忘相關(guān)物品，另一方面也可為以后同一實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作提供依據(jù)，使實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作逐步趨于程序化，從而在有效低實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作量的同時(shí)，最大限度地提高準(zhǔn)備效率。還有一點(diǎn)很重要，在科研型實(shí)驗(yàn)室里就不能不說導(dǎo)師和師兄師姐，其實(shí)他們才是最具價(jià)值的“活文獻(xiàn)”，他們就是實(shí)驗(yàn)室里的參考文獻(xiàn)，活參考書。生物就是一門實(shí)驗(yàn)的科學(xué)，其中科研經(jīng)驗(yàn)的積累就是一個(gè)非常重要的組成部分，導(dǎo)師和師兄師姐的一句話往往可以事半功倍，大幅提高實(shí)驗(yàn)的成功率和效率�？傊�，為了保證實(shí)驗(yàn)過程高質(zhì)高量完成，除了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)過程外，還要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員必須具備相應(yīng)的素質(zhì)，實(shí)驗(yàn)操作人員必須具備較扎實(shí)的專業(yè)基礎(chǔ)、熟練的實(shí)驗(yàn)技能及高度的責(zé)任心，在工作中要善于總結(jié)，同時(shí)還要和理論課老師積極溝通，這樣才能夠真正的學(xué)好微生物實(shí)驗(yàn)這門課程。

友情提示：本文中關(guān)于《微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)》給出的范例僅供您參考拓展思維使用，微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)：該篇文章建議您自主創(chuàng)作。

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