水質分析微生物檢測培訓總結
水質分析微生物檢測培訓總結
201*年5月14日至5曰17日,我參加了由武漢水務集團有限公司水質監(jiān)測中心舉辦的為期四天的水質分析微生物檢測培訓班。本次培訓班主要針對生活飲用水中細菌數指標即細菌總數和總大腸桿菌群的分析方法而進行的培訓,通過這次培訓,使我受益匪淺,以下是對這次學習作的一個總結:
一通過學習,了解到水中所含有的細菌來源于空氣、土壤、污水、垃圾和動植物的尸體,所以水中細菌的種類是多種多樣的,其中包含病原菌、通過水傳播的疾病有痢疾、傷寒、霍亂、肝炎和急性腸胃炎等,這些將對人體健康具有潛在的危害性,原水經過凈化消毒后,細菌總數和大腸桿菌群指數如果能達到飲用水標準的要求,說明病原菌被殺滅,普通細菌也明顯減少,因此水中細菌總數和總大腸桿菌群的測定是評價水質清潔程度和考核給水凈化效果的指標之一。二水中細菌的檢測方法
1細菌總數(平皿計數法):水樣在營養(yǎng)瓊脂上在有氧條件下37℃培養(yǎng)48小時后,所得1mL水樣所含菌落的總數。
以無菌操作方法用無菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣注入滅菌平皿中,傾注約15mL已融化并冷卻45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,并立即旋勻平皿,使水樣與培養(yǎng)基充分混勻,待冷卻凝固后,翻轉平皿,使底面向上
,置于36±1℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48小時,進行菌落計數,此即為水樣1mL中的菌落總數。
2總大腸菌群檢測方法有:多管發(fā)酵法、濾膜法、酶底物法
2.1多管發(fā)酵法:總大腸菌群指一群在37℃培養(yǎng)24小時能發(fā)酵乳糖,產酸產氣,需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。取10mL水樣接種到10mL雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,取1mL水樣注入到9mL滅菌生理鹽水中,混勻后吸取1mL注入到10mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,每一稀釋度接種5管,將各種管置36±1℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24±2小時,如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產氣產酸,則可報告為總大腸菌群陰性,如有產酸產氣者,將產酸產氣的發(fā)酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上,于36±1℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)18~24小時,觀察菌落形態(tài),挑取符合特征的菌落作革蘭氏染色、鏡檢和證實實驗。2.2濾膜法:總大腸菌落濾膜法是指用孔徑為0~4.5um的微孔濾膜過濾水樣,將濾膜貼在摻加乳糖的選擇性培養(yǎng)基上37℃培養(yǎng)24小時,能形成特征性菌落的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌以檢測水中總大腸菌群的方法。用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分,將粗糙面朝上貼放在已滅菌的濾床上,固定好濾器,將100mL水樣注入濾器中,打開濾器閥門,在-5.07*104Pa下抽濾,水樣抽濾完后再抽氣約5秒,關上濾器閥門,取下濾器,用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分,移放在紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上,濾膜截面細菌面向上,濾膜應與培養(yǎng)基完全貼緊,兩者間不得留有氣泡,然后將平皿倒置,放入37℃恒溫箱內培養(yǎng)24±2小時,挑取符合特征菌落進行革蘭氏染色,鏡檢。
2.3酶底物法:總大腸菌群酶底物法是指在選擇性培養(yǎng)基上能產生β-半乳糖苷酶的細菌群組,該細菌群組能分解色原底物釋放出色原體是培養(yǎng)基呈現(xiàn)顏色變化,以此來檢測水中總大腸菌群。
以上是我這次培訓所學內容的小結,通過學習,不僅提高了細菌分析的知識,也為以后開展新的微生物項目打下了良好的基礎。
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