肺結核痰涂片檢查工作規(guī)范

肺結核痰涂片檢查工作規(guī)范

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痰涂片檢查是肺結核病人診斷與鑒別診斷、制定化療方案、療效考核的主要方法或手段。為貫徹落實市衛(wèi)生局《關于在全市一級以上醫(yī)療單位中開展傳染性肺結核篩查工作的通知》的精神，加強傳染性肺結核病人發(fā)現力度，特制定本規(guī)范。

一、痰檢的對象和要求

（一）對象

1．咳嗽、咳痰≥3周或有咯血或血痰癥狀以及胸片異常者。

2．進行療效考核的病人：凡已確診、登記、治療的肺結核病人，在化療期間應按規(guī)定定期作痰菌復查。

1）初治涂陽病人（含重癥涂陰病人）在療程滿2、5、6個月時，復治涂陽病人在療程滿2、5、8個月時，各查痰一次。

2）初、復治涂陽病人在療程滿2個月時，痰菌仍為陽性者，應在治療滿3個月時增加查痰一次。

3）確診、登記的涂陰肺結核病人，即使病人因故未接受治療，也應在登記后滿2和6個月時進行痰菌檢查。

（二）要求

1．初診病人應送3份痰標本（夜間痰、清晨痰和即時痰）。如無夜間痰，在留清晨痰后2～3小時再留取一份痰標本；或在送痰時，留取兩份即時痰。治療中或復診隨訪病人按期每次送檢兩份痰（清晨痰和夜間痰）。

2．痰標本采集：即時痰為病人就診時咳出的痰液。清晨痰為清晨深咳出的痰液。夜間痰為就診前一天晚睡前咳出的痰液。痰標本應以膿樣、干酪樣或膿性粘液樣性質的痰液為合格標本，痰量應為3～5毫升。

應由檢驗人員或專人驗收痰標本，痰液不合格者，要求重新送檢。難以獲得合格標本時，也應進行細菌學檢查，但應注明標本性狀以供分析結果時參考。

痰標本的容器，應采用國家參比實驗室推薦的國際通用痰瓶或采用直徑4厘米、高2厘米的塑料或涂蠟紙密閉盒。留痰容器上應注明病人姓名、編號（門診序號或病人登記號）及日期。

3．痰標本的保存和輸送：痰標本容器密封，勿倒置，嚴防痰液外溢。不能立即作涂片檢查的痰標本，須置4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。需送上一級細菌實驗室培養(yǎng)的痰標本，外送前應認真核對痰標本容器上標

注，是否正確和清晰，是否與化驗單一致。痰容器應采用專用的結核桿菌和痰標本冰盒運送，或以紙張和塑料袋封裝、扎牢順序放置于包裝袋內。盒外注明勿倒置標志。

4．送檢時，縣（市、區(qū)）結防所（科）醫(yī)師應填寫檢驗單。填寫項目包括：病人姓名、地址、登記號（或門診序號）、送檢日期（或初診日期）、送檢原因（初診病人或隨訪病人）。檢驗單應與痰標本分別放置在不同容器中，一齊送交上級實驗室。

5．收到痰標本后，實驗室檢驗人員仔細核對標本和檢驗單各項內容，查看痰標本是否合格。隨后按順序編號，及時檢查和登記。

6．廢棄標本和污染物的處理：

1）痰盒和廢棄標本等污染物，均須經高壓蒸汽滅菌后才能丟棄或清洗，嚴禁不經滅菌隨意處理。

2）痰盒等污染物如采用焚燒處理，須置于焚燒爐內徹底焚化。焚化不徹底，或暴露焚燒是有害的。

3）痰檢工作臺面的消毒：可將痰標本置于一搪瓷盤中，在操作廚中進行痰涂片操作。涂片操作完成后，將盤與廢棄物等一并進行高壓蒸汽滅菌，或與操作臺面同時以3％石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外線滅菌燈（距離1米）照射30分鐘。

二、痰直接涂片檢查法

（一）涂片

取經95％乙醇擦拭脫脂過的干燥、清潔、無油污、無劃痕的新玻璃片，于玻片背面的左端1／3處以藍色或黑色記號筆（玻璃鉛筆）編號。

用接種環(huán)或折斷的竹簽茬端，挑取痰標本的膿樣、干酪樣部分約0．05～0．1ml，于玻片正面的右側三分之二處均勻涂抹成2×2．5厘米卵圓形痰膜。自然干燥后待檢。

一張玻片只可涂抹一份標本。玻片只應使用一次，不得清洗后再次使用。

（二）萋爾尼爾遜氏染色法（ZiehlNeelsen）

簡稱萋尼氏染色法：

1．試劑：

1）堿性復紅乙醇染色儲存液：

堿性復紅液：8克堿性復紅溶于95％乙醇100毫升中。

5％石碳酸水溶液：5克石碳酸溶于100毫升蒸餾水中。

2）堿性復紅乙醇染色液：

10毫升堿性復紅儲存液與90毫升5％石碳酸水溶液混合。

3）5％鹽酸乙醇脫色液：

5毫升濃鹽酸與95毫升95％乙醇混合。

4）0。3％亞甲蘭復染儲存液：

0．3克亞甲蘭溶于50毫升95％乙醇中，完全溶解后加蒸餾水至終體積100毫升。

5）亞甲蘭復染液：

以蒸餾水10倍稀釋0．3％亞甲蘭復染儲存液即得亞甲蘭復染液。

2．染色步驟：

1）火焰固定涂片。

2）滴加堿性復紅乙醇染色液，蓋滿痰膜。小心火焰加熱至出現蒸汽后，脫離火焰，保持染色三分鐘。染色期間應始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時可續(xù)加染色液。切勿使染色液沸騰。

3）流水自玻片背面上端輕洗，洗清染色液。

4）自痰膜上端外緣滴加脫色液，流過痰膜。需脫至痰膜無可視紅色為止。脫色應單片進行。

5）流水自玻片背面上端輕洗，去脫色液。

6）滴加亞甲蘭復染液，染色30秒鐘。

7）流水自玻片背面上端輕洗，去復染液。

8）待干后鏡檢。

3．鏡檢與報告：

光學顯微鏡鏡檢(目鏡lOX，油鏡IOOX)染色痰片。在淡藍色背景下，抗酸桿菌呈紅色，其它

細菌和細胞呈藍色。

按照下列標準報告所得結果：

1）抗酸桿菌陰性：連續(xù)觀察300個不同視野，未發(fā)現抗酸桿菌。

2）抗酸桿菌可疑(土)：12條抗酸桿菌／300個視野。

3）抗酸桿菌陽性(1+)：39條抗酸桿菌／100個視野。

4）抗酸桿菌陽性(2+)：l9條抗酸桿菌／10個視野。

5）抗酸桿菌陽性(3+)：l9條抗酸桿菌／每個視野。

6）抗酸桿菌陽性(4+)：≥10條抗酸桿菌／每個視野。

鏡檢結果，應及時記錄在“結核病細菌學實驗室登記本“和化驗報告單上。痰涂片化驗單應包括痰標本的性狀。陰性結果應填記“陰性”不得以“（）”表達。300個視野內僅見1～2條抗酸桿菌者，應在報告單上注明條數，醫(yī)生可結合胸片進行判斷。必要時再取標本復查證實，仍見1～2條抗酸桿菌／300個視野，該病例可確診為涂陽病人。標本應在送檢48小時內報告結果。

三、痰涂片質控工作

為了進一步提高痰檢涂片及診斷水平，市疾控中心每年兩次組織專家對市（縣）、區(qū)疾控中心痰片制做質量和診斷水平進行抽查。

擴展閱讀：鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院結核病痰涂片檢查點設置及實驗室操作規(guī)程

附件：

鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院結核病痰涂片檢查點設置及實驗

室操作規(guī)程

在以縣（市）為單位實施現代結核病控制策略（DOTS）的地區(qū)，通過在鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院設結核病痰涂片檢查點（以下簡稱查痰點），方便肺結核可疑癥狀者和疑似肺結核病人的就診查痰，以達到提高涂陽肺結核病人發(fā)現率，縮短傳染性肺結核病人的就診延誤和治療延誤時間，降低結核病傳播的目的。

一、鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點工作職責

（一）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點負責轄區(qū)及周圍鄉(xiāng)鎮(zhèn)肺結核可疑癥狀者和疑似肺結核病人的痰檢工作。

（二）查痰點是結核病診斷的初篩單位，凡痰涂片陽性病人或痰涂片陰性但高度懷疑肺結核者需轉至縣級結防機構進一步檢查確診。

（三）鏡檢陽性的痰涂片2日內應得到縣級結防機構實驗室確認，陰性涂片一周內應得到縣級結防機構實驗室的復驗。痰涂片的轉送方法可根據當地情況決定。

（四）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點實驗室須按要求做好痰涂片保存和各項資料的登記、統計管理工作。

二、查痰點的基本要求

（一）痰涂片檢查點首先應做好實驗室工作用房的準備，根據鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院現有工作用房進行合理調整和布局。實驗室面積不小于10平方米，按功能劃分為操作區(qū)，用于痰涂片制備、染色，相對潔凈區(qū)，用于鏡檢、登記等（見圖1）。

（A）供收集痰標本使用；（B）痰涂片制備；（C）染色池；（D）洗手池；（E）顯微鏡讀片；（F）實驗室登記和痰涂片儲存

圖1：痰涂片檢查實驗室基本布局

（二）依據《病原微生物實驗室生物安全管理條例》規(guī)定，查痰點實驗室須具備開展痰涂片檢查工作的水源、消毒、污物處理等一般檢驗條件。

（三）查痰點需有專人負責，技術人員須經培訓合格后方可從事痰涂片檢查工作（附表1）。

（四）查痰點需配備雙目顯微鏡一臺（含100倍油鏡）和紫外線燈；上級結核病防治機構統一配備的染色試劑、登記本、檢驗單、玻片、痰盒等日常工作物品。

（五）已具備上述基本條件的查痰點，經地（市）級和縣級結核病防治機構驗收合格，并經縣級結核病防治機構上報省、地（市）級結防機構備案后即可開展工作（附表2）。

三、檢查對象

就診及轉診的疑似肺結核病人,一般包括持續(xù)咳嗽、咳痰超過3

周；咳血或伴有血痰；發(fā)熱或胸痛超過2周；胸部X線檢查異常。

四、檢查程序

（一）接診病人：對所有肺結核可疑癥狀者和疑似肺結核病人，應在內科或呼吸科門診進行登記，由門診醫(yī)生開具三張?zhí)低科瑱z查單（附表3）。

（二）痰標本收集：在三個痰標本盒上注明病人的姓名、編號、檢查日期和容器序號。病人首次留痰前應指導病人，留取“即時痰”、“夜間痰”、“晨痰”合格的痰標本，對所送不合格痰標本除常規(guī)檢查外，應要求患者重新送檢。

（三）實驗室登記：按照年度病人序號和痰標本序號在實驗室登記本上進行登記（見附表4），并以同樣的號碼在痰涂片檢查單上進行標記。檢驗單的病人姓名應與實驗室登記本一致。

（四）痰涂片檢查：對病人送的痰標本應及時按操作規(guī)程進行涂片、染色和顯微鏡檢查。

（五）痰涂片檢查結果登記與報告：及時在登記本上登記痰涂片檢查結果。當病人的三次痰涂片檢查完成后，發(fā)現有陽性痰涂片，應在規(guī)定時間內報縣結核病防治機構，縣級結核病防治機構應及時對痰涂片進行確認。

（六）痰涂片的保存：每個查痰點鏡檢后的全部痰涂片應按實驗室登記本序號連續(xù)排列，分別存放在各點固定的玻片盒中，供上級實驗室復核確認。

（七）痰檢質量控制：每個痰涂片檢查點均按照中國結核病防治規(guī)劃《痰涂片鏡檢質量保證手冊》的要求，作為一個獨立的被質控單位接受室間質量評估和檢查工作。

五、痰涂片抗酸染色檢查法（一）痰標本的采集

肺結核可疑癥狀者或肺結核病人送痰時，醫(yī)護人員或痰檢人員應向病人解釋，使病人充分了解留好痰標本的重要性，并指導病人如何從肺部深處咳痰。采集痰標本時應在遠離人群的開放空間進行，或在通風良好的室內進行。標本量一般在3～5ml。

1、痰標本盒：應采用WHO推薦的國際通用螺旋蓋痰瓶，或可密封塑料盒、蠟紙盒收集痰標本。痰標本盒上注明病人姓名、編號、檢查項目和容器序號“1”、“2”、“3”（1為當日即時痰，2為夜間痰，3為次日晨痰）。

2、痰標本的性狀：合格的痰標本應是患者深呼吸后，由肺部深處咳出的分泌物。合格的痰標本包括干酪痰、血痰、粘液痰。唾液或口水用于病人確診時為不合格痰標本。

（1）干酪痰標本外觀以黃色(或奶酪色)、膿樣、團塊狀的肺部分泌物為主，粘度較粘液痰低，制片時較易涂抹；涂片染色后鏡檢，可發(fā)現大量膿性炎癥細胞、肺上皮脫落細胞。由于此類標本是由肺部深處咳出，對肺結核的診斷最有價值，故抗酸桿菌陽性檢出率較高。

（2）血痰此類標本是因粘液痰或干酪痰標本中混有血液而形成，顏色為褐色或深褐色、鮮紅色或伴有血絲；涂片染色后鏡檢除能夠觀察到粘液痰或干酪痰的細胞特征外，含新鮮血液的標本中可見到被染色的血細胞。由于含血標本易干擾抗酸桿菌鏡檢的結果，故在制片時應盡量避免挑取含血標本。

（3）粘液痰標本外觀以白色、粘稠度較高的肺部和支氣管分泌物為主，制片時需仔細涂抹；涂片染色后鏡檢時，鏡下可見支氣管內膜纖毛柱狀上皮細胞，伴有少量肺上皮脫落細胞、膿性炎癥細胞、口腔脫落細胞及口腔寄生菌。此類標本的抗酸桿菌陽性檢出率較唾液高。

（4）唾液目視觀察標本整體外觀，以透明或半透明水樣、粘

度較低的口腔分泌物為主，標本中有時伴有氣泡；涂片染色鏡檢時，鏡下可見少量口腔上皮脫落細胞和口腔內寄生菌，有時可見食物殘渣。由于此類標本進行抗酸桿菌檢查時的陽性檢出率很低，用于對患者確定診斷時是不合格的標本。所以，當病人初次留痰即為唾液時，應囑病人重送并指導病人如何留取合格標本。

3、痰標本采集時間：根據痰標本的采集時間，將痰標本分為三類：

（1）即時痰病人就診時深呼吸后咳出的痰液。應確保每個初次就診病人均留取即時痰進行檢查。

（2）晨痰患者晨起立即用清水漱口后，咳出的第2口和第3口痰液。

（3）夜間痰送痰前一日，患者晚間咳出的痰液。（二）痰涂片制作

1、在進行痰涂片檢查前對新的玻片用95%的乙醇擦拭（或浸泡）脫脂，經干燥、清潔、檢查無油污、無劃痕后作為合格的玻片備用。在已經準備的痰玻片背面左端的1/3處注明編號(如使用的載玻片一端無磨砂面，使用玻璃刻刀注明編號；如使用的載玻片一端有磨砂面，可使用2B鉛筆在磨砂面上直接書寫)。

2、小心打開痰標本盒，防止產生氣溶膠或使標本外溢。仔細觀察標本，使用折斷的竹簽茬端，挑取痰標本中干酪樣、膿樣或可疑部分約0.05～0.1ml，于玻片正面右側2/3處，均勻涂抹成10×20mm的卵圓形痰膜。痰膜朝上靜自然干燥后(一般約需要30分鐘)進行染色鏡檢。當氣溫低，痰膜不易干燥時，嚴禁將玻片直接在火焰上烘拷，以防產生氣溶膠或痰膜脫落。一張載玻片上只能涂抹一份痰標本，一張載玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色檢查。

3、涂抹完畢后的痰標本，在檢查結果報告前，應暫時保留。以

備涂片、染色不合格影響鏡檢結果時，重新涂片和染色之用。

（三）萋－尼氏染色

1、涂片自然干燥后，放在染色架上，玻片間距保持在10mm以上的距離；火焰固定(在5秒鐘內將玻片于火焰上來回烘烤4次)。

2、滴加石碳酸復紅染液，蓋滿痰膜，火焰加熱至出現蒸汽后，脫離火焰，保持染色5分鐘。染色期間應始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時可續(xù)加染色液。加溫時勿使染色液沸騰。

3、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去染色液，瀝去標本上剩余的水。

4、自痰膜上端外緣滴加脫色劑布滿痰膜，脫色1分鐘；如有必要，需流水洗去脫色液后，再次脫色至痰膜無可視紅色為止。

5、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去脫色液，瀝去玻片上剩余的水。

6、滴加亞甲藍復染液，染色30秒鐘。

7、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去復染液，瀝去標本上剩余的水。待玻片干燥后鏡檢。

一張染色合格的痰玻片，由于被亞甲藍染色而呈亮藍色。將染色后的玻片放在報紙上，如果報紙上的文字透過痰膜不能被看清，表明該玻片涂抹過厚。

（四）顯微鏡檢查

1、使用10倍目鏡雙目顯微鏡讀片。

2、取染色完畢且已干燥的玻片，痰膜向上放在玻片臺上并以卡尺固定。首先使用40倍物鏡，轉動卡尺移動玻片至痰膜左端，將光線調節(jié)至適當亮度，調節(jié)焦距至可見細胞形態(tài)；移開40倍物鏡，在玻片上滴1～2滴鏡油，使用100倍油鏡進行細致觀察。在淡藍色的背景下，抗酸菌呈紅色，其他細菌和細胞呈藍色。為防止抗酸桿菌

的交叉污染，嚴禁鏡頭直接接觸玻片上的痰膜。

3、讀片方法：首先應從左向右觀察相鄰的視野；當玻片移動至痰膜一端時，縱向向下轉換一個視野，然后從右向左觀察，依此類推。通常10×20mm大小的痰膜，使用100倍油鏡，每行可觀察100個視野，觀察三行則約為300個視野。仔細觀察完300個視野，一般至少需要5分鐘以上。一位鏡檢人員連續(xù)閱讀10-12張玻片后應休息約20分鐘。

4、分枝桿菌的基本形態(tài)：當患者標本直接進行涂片鏡檢時，能夠發(fā)現不同種的分枝桿菌形態(tài)。結核分枝桿菌多數為桿狀、稍彎曲；菌體寬度0.3～0.6m；菌體長度不一，在0.5～8m之間，多數在1.5～3.5m；含結核分枝桿菌較多的新鮮標本經萋－尼氏染色后，100倍油鏡觀察，可見單個存在的，也能看到聚集成簇或分枝狀排列的菌體，染色良好痰標本，可見菌體內著色較深的異染顆粒。

（五）鏡檢結果報告與登記

痰涂片鏡檢的結果報告，不僅是對結核病的診斷提供依據，報告的數量也一定程度的反映疾病嚴重程度和傳染性的大小。痰涂片鏡檢結果的登記應按照鏡檢結果的分級報告標準登記在結核病細菌學實驗室登記本上和痰檢驗單上。不能只填寫陰性、陽性或(－)、(+)等。

萋尼氏染色鏡檢結果分級報告標準

抗酸桿菌陰性(－)：連續(xù)觀察300個不同視野未發(fā)現抗酸桿菌。

報告抗酸桿菌菌數：1～8條/300視野�？顾釛U菌陽性（1＋）：3～9條/100視野�？顾釛U菌陽性（2＋）：1～9條抗酸桿菌/10視野。抗酸桿菌陽性（3＋）：1～9條抗酸桿菌/每視野。

抗酸桿菌陽性（4＋）：≥10條抗酸桿菌/每視野。（六）抗酸染色玻片的處理

閱讀完萋尼氏染色玻片后，應立即用浸滿二甲苯（分析醇）的擦鏡紙揭取數次，徹底去除玻片上的鏡油。經脫油干燥后的玻片，按實驗室序號及涂片編號放在玻片盒中，存放在陰涼干燥的環(huán)境中，以備復檢或質控抽檢。

六、痰涂片抗酸染色檢查注意事項

痰涂片抗酸染色檢查要注意預防假陽性和假陰性結果的產生。假陽性是指將陰性涂片錯誤判讀為陽性，假陰性是指將陽性涂片錯誤判讀為陰性。屬于技術因素的影響要通過一系列實驗室內和實驗室間的質量控制不斷改善。

（一）假陽性結果的預防措施

1、必須使用新的載玻片進行痰涂片檢查。2、每個標本均使用一個新竹簽完成制片涂抹。3、所有染液均經過過濾。

4、染色時玻片彼此之間保持一定距離，相互徹底分隔開。5、嚴禁使用染色缸將玻片放一起染色。6、染色時勿使玻片上的染液干燥。

7、滴加鏡油時，嚴禁容器滴口直接接觸玻片痰膜。8、嚴禁物鏡鏡頭直接接觸玻片痰膜。

9、完整、準確的標注痰盒、玻片和實驗室登記本的各項內容。10、登記前、后對檢驗單和標本盒上的標注進行仔細核對。11、認真按照要求讀片，準確記錄和報告結果。（二）假陰性結果的預防措施1、確認標本是痰而非唾液。2、確認每份標本至少有3ml。

3、選擇膿樣、干酪樣、粘液分泌物涂抹制備玻片。4、制備玻片時標本涂抹均勻，不要太厚或太薄。5、使用高質量染料、嚴格按照配方配制染液。6、嚴格按照操作程序完成染色過程。

7、判斷結果為“陰性”前，必須閱讀規(guī)定要求的視野數。8、作為對照，可采用已知結果為陽性的玻片，完成染色鏡檢過程。

9、完整、準確地標注痰盒、玻片和實驗室登記本。10、登記前對檢驗單和標本盒上的標注進行仔細核對。11、準確記錄和報告結果。七、痰玻片的保存

（一）鏡檢后的涂片應及時用浸滿二甲苯的擦鏡紙徹底去除涂片上的鏡油。

（二）再次核對實驗室登記本與每張涂片實驗序號。（三）嚴禁在涂片上標記鏡檢的陰、陽性結果。

（四）按實驗室登記本序號連續(xù)排列全部涂片，存放于玻片盒內。（五）涂片保存與實驗室登記本記錄應保持一致。初診病人第一張涂片存入涂片盒后需預留出兩個空位，以備第二張、第三張涂片檢查后放入。

（六）保存近期3個月的全部痰涂片待各級實驗室質量控制抽檢，如果年涂片量不足500張，必須全部保存。

（七）裝滿涂片的玻片盒，需用標簽注明涂片實驗序號區(qū)間和日期區(qū)間，以便日后盲法復檢或現場評價時抽樣。

八、實驗室管理（一）顯微鏡日常維護

顯微鏡作為發(fā)現涂片陽性病人的重要設備，實驗室工作人員應正

確使用并給予正確維護，以保證其正常工作和延長使用壽命。在使用和維護顯微鏡時應特別遵守下列要點：

1、顯微鏡應放在干燥、無塵和通風的環(huán)境中。如果顯微鏡一段時期內停止使用，應拆開并放在原包裝盒內，并放有效的干燥劑。

2、使用前和使用后必須使用擦鏡紙徹底清潔物鏡。3、嚴禁物鏡鏡頭直接接觸玻片上痰膜。4、使用油鏡時，只能使用細螺旋調節(jié)焦距。

5、使用電光源顯微鏡時，注意電壓和電流是否與儀器要求相匹配。

（二）耗材供應與管理

為保障痰涂片檢查工作能夠連續(xù)不斷開展，應儲存一定數量的實驗耗材和相應試劑，儲備量可根據工作量來進行計算，一般應準備比平均工作量高20％的相應耗材和試劑。染色試劑應由省結核病參比實驗室或經省級結核病參比實驗室進行了質量控制的地（市）級結核病參比實驗室組織統一配制和供應，其它耗材可根據當地情況由省、地或縣統一供應。各項物資、耗材按照需要供應，并保證達到質量要求。每個查痰點每檢查1000份痰標本所消耗的材料列表如下：

材料痰盒竹簽載玻片載玻片盒(100張/盒)初診病人登記本實驗室登記本痰涂片檢查單記號筆（玻璃刻刀或2B鉛筆）10

用量（每檢查1000份痰標本）1200個1200個1200張10個1本1本20本（50張/本）2支試劑名稱用量（每檢查1000份痰標本）石碳酸復紅5000ml亞甲基藍5000ml5%鹽酸酒精10000ml鏡油二甲苯定性濾紙擦鏡紙110ml110ml6張1本（三）實驗室人員安全防護

1、嚴格遵守實驗室安全操作規(guī)程，實驗室的技術人員必須經過生物安全培訓后方可上崗。

2、嚴格遵守實驗室安全操作規(guī)程，警惕分枝桿菌氣溶膠的產生。3、實驗室應嚴格限制非實驗室人員進入，減少實驗室內外交叉生物污染。完成實驗工作離開實驗室，要關好門窗。

4、進入實驗室，盡量避免攜帶非必需物品。實驗臺上不放任何與實驗無關的物件或私人用品。

5、工作人員進入實驗室，應穿工作服并注意著裝整齊，操作時應戴口罩、帽子和手套，長發(fā)者須將頭發(fā)裝束在帽子內。

6、實驗室內應保持肅靜，試驗過程中禁止一切與試驗無關的活動，以保證集中精力完成實驗操作。

7、實驗室內禁止吸煙、飲食及用嘴濕潤鉛筆或標簽等，也不要以手撫摩頭面部等。

8、實驗前須開啟紫外燈對實驗室和操作區(qū)域進行照射消毒1小時以上；實驗結束后，開啟紫外燈對操作區(qū)和實驗室進行照射消毒2小時以上。

9、實驗結束后，操作人員要用清潔劑（或肥皂）和清水充分洗凈。

10、每次實驗操作終止后，必須清理好實驗臺，所有物品歸位并用70%酒精或3-5%石碳酸等有效消毒劑擦洗實驗臺和地面。

11、實驗室中的生物危險物要根據檢查項目和性質的不同，局限

在相應的實驗室或試驗區(qū)域內，不得隨意將其帶到其它區(qū)域進行。

（四）污物消毒與處理

1、痰標本、被污染的一次性用品及實驗室垃圾應經高壓滅菌后丟棄，或者使用專用的焚燒爐或固定的垃圾坑進行焚燒。

2、每次完成檢查后，操作臺和實驗區(qū)域內經紫外燈近距離照射消毒2小時以上。

3、實驗過程中，如標本被打翻污染了操作臺或地面，應以大于污染面積的紗布或衛(wèi)生紙吸滿5%的苯酚溶液或70%酒精，覆蓋污染區(qū)，30分鐘后方可移去，再經紫外線近距離照射。

附表：1、鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院痰檢人員培訓記錄表

2、基本情況調查表3、檢驗單參考式樣

4、結核病細菌學實驗室登記本

附表2：

______縣（市）基本情況調查表

一、一般情況

省名：地（市）名：縣（市）名：縣編碼：上年末人口數（萬）：地理面積:(平方公里)地貌特征：山區(qū)丘陵平原湖區(qū)貧困縣：是（國家級、省級）否鄉(xiāng)鎮(zhèn)數:村數:縣級綜合醫(yī)院數目（個）:鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院數目（個）:中心衛(wèi)生院數目（個）:

二、縣（市）結核病防治機構情況全縣開始實施DOTS的時間:200年月

從事結防工作的專職人員數:人，兼職人員數：人從事痰涂片檢查的專職人員數:人，兼職人員數：人其中鄉(xiāng)鎮(zhèn)痰檢點的專職人員數:人，兼職人員數：人

專職痰涂片檢查人員經過省級專業(yè)培訓：人，地市級專業(yè)培訓：人結防所距縣邊界最遠距離：公里最近距離：公里

三、縣（市）結核病防治工作情況

上一季度初診病人就診情況：初診病人數合計：

其中：縣級及以上綜合醫(yī)院轉診病人數:

鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院轉診病人數:病人自行就診人數：

上一季度肺結核可疑癥狀者和疑似肺結核病人數：上一季度胸部X線異常人數：

上一季度查痰人數：痰標本檢查數：發(fā)現陽性痰標本數：上一季度發(fā)現活動性肺結核病人數:

其中：涂陽病人總數:

新涂陽病人數:涂陰病人數:

四、鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院設置痰涂片檢查點情況

點序號鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院（中心衛(wèi)生院）名稱人口覆蓋（萬人）覆蓋鄉(xiāng)數（個）上一年平均日門診量平均服務半徑（公里）距縣結防所的距離（公里）實驗室場地（有、無）基本條件實驗室上下水道（有、無）實驗室人數雙目顯微鏡（有、無）以及使用年限是否有油鏡頭

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